分光光度计有效测量范围生化实验验证.PDFVIP

　第 26 卷 第 2 期 实 验 室 研 究 与 探 索 Vol . 26 No . 2 　 　2007 年 2 月 RESEARCH AND EXPLORATION IN LABORATORY Feb . 2007 　 分光光度计有效测量范围的生化实验验证 何正平 , 　陆　红 , 　吴忠良, 　江培　 (复旦大学 生物科学教学实验中心 生物化学实验室 ,上海 200433) 摘 　要 :为了在生物化学实验讲解中更直观地说明使用分光光度计时的有效测量范围 ,分别测定了不同 浓度的苯丙氨酸和p SK 质粒的光吸收值 ,与相应的标准浓度对照 ,计算出不同光吸收值的偏差 ,得到光 吸收值与测量偏差的曲线 。实验结果表明 ,当光吸收值小于 0 . 1 和大于 1. 0 时 ,测量偏差超过 10 % ,而 当光吸收值在 0 . 1～1. 0 之间时 ,测量偏差小于 10 % ( 当光吸收值在 0 . 3～0 . 7 之间时 ,测量偏差小于 4 %) ,测量值有效可信 。本实验以氨基酸和核酸两种物质为例 ,验证了分光光度计的有效测量范围为 0 . 1～1. 0 。 关键词 :有效测量范围;光吸收值 ;偏差 ( ) 中图分类号 :Q 53 文献标识码 :A 文章编号 :1006 - 7167 2007 02 - 0033 - 02 Biochemical Exp eriment al Definition in Reliable Me a surement of Sp ectrop hotomet er HE Zhengp ing , 　L U Hong , 　WU Zhongliang , 　J IAN G Peihong (Lab . of Biochemistry , Teaching Center of Biology , Fudan Univ. , Shanghai 200433 , China) Abstract : To show the reliability of spectrophotometric measurements in the experimental teaching , A280 for serial dilution of phenylalanine and A260 for serial dilution of plasmid p SK were taken . For each sample , the percentage standard deviation was plotted . The results show that the standard deviation is up 10 % for low and high spectrophotometric values , and the standard deviation is below 10 % for spectrophotometric values between 0 . 1 and 1. 0 (as little as 4 % for readings between 0 . 3 and 0 . 7) . The spectrophotometric values between 0 . 1 and 1. 0 are very reproducible . Key words : reliable measurements ; spectrophotometric values ; deviation