饥饿诱导斑马鱼Slc7a3a突变体产生脂肪肝的分子机制分析-遗传学专业论文.docxVIP

致谢致谢 致谢 致谢 感谢国家973项目(课题名称：肝脏发育和再生关键基因的鉴定及以遗传调 控研究2012对本研究的经费支持! 从08年3月份踏入水生所开始，转眼间已经在这里学习和生活了6年的时 光。回首往事，曾经的日子就像一部部微电影，在我的脑海里闪现出一段段难以 忘怀的记忆。目送过很多师兄师姐毕业离开，今年的毕业季，到了我该跟这个熟 悉的地方说再见了。在这里，我想感谢多年来关心和帮助过我的老师和朋友们。 感谢我的导师崔宗斌研究员。他以渊博的学识和坚毅的探索精神指引着我在 科研的道路上克服一个又一个的难题，培养了我对生命科学的浓厚兴趣，让我体 验到了科研的无尽乐趣。崔老师呕心沥血，为我们提供一流的科研条件，对我们 进行专业的科研训练，他无私地把知识传授给我们，让我们能够学有所成。从实 验设计到最后论文的撰写，每一个细节都凝聚着崔老师大量的心血和汗水。崔老 师敏锐的科研洞察力和严谨的学术态度，以及大胆执着的科研精神为我人生的道 路点亮了一盏盏明灯，照亮了我前进的方向，让我在科研的道路上勇往直前。 感谢师母李青老师。这些年来她对我的实验和生活提供了无微不至的关心和 帮助，这些都是保证我今天能够顺利完成毕业答辩的不可或缺的条件。李老师对 待我们每一个学生，都像自己的亲人一样支持和照顾，让我们感受到了一个大家 庭的温暖和幸福，让我们能够轻松愉快地进行科研和生活。李老师为我们实验室 无私奉献的精神值得我们毕生学习。 感谢龙勇副研究员。从斑马鱼的饲养到细胞的培养，他无私地教会了我多种 分子实验技术，为我IliON地开展课题打下了扎实的基础；感谢宋桂丽老师，她为 我克服实验过程中的难题提供了很多无私的技术指导和帮助；感谢颜仁强老师以 及黎明老师在斑马鱼的饲养和显微注射中提供的无私帮助。 感谢本实验室何小镇、冯国辉、刘春艳、杨小杰、周波兰、陈凯、严军军、 李晓辉、李西西；以及武汉大学基础医学院的陆星、杨萍、李绍阳、岑翔、马良 鹏、赵熠、林立、刘凌俊等同学，在日常的学习生活中，他们给我提供了很多帮 助；感谢曾近在我们实验室工作过的裴德胜老师、莫赛军老师、厉洁师姐、王璐 师姐、商汉桥师兄、李媛媛师姐，从我踏进这个实验室的第一天起，他们无私地 T 饥饿诱导斑马鱼Slc7a3a突变体产生脂肪肝的分子机制教会了我很多实验的知识，给我提供了很多的帮助。 饥饿诱导斑马鱼Slc7a3a突变体产生脂肪肝的分子机制 教会了我很多实验的知识，给我提供了很多的帮助。 感谢殷战老师、肖武汉老师、李仁辉老师和戴和平老师，以及他们实验室的 成员在仪器使用上提供的便利和帮助。感谢李涛老师、林燕老师、熊杰老师在高 通量测序中提供的无私技术支持和帮助：感谢娄气勇老师在很多实验技术中提供 的无私帮助；感谢陈晓文同学在冰冻切片，整体原位杂交等很多实验中提供的技 术支持，以及对本论文的完善所提出的大量建议和帮助；感谢翟刚同学在共聚焦 显微镜使用上提供的技术支持；感谢张伟师兄(肖老师实验室)、李周全同学在 Western blot上提供的技术支持；感谢何立波同学在细胞免疫荧光上提供的帮助； 感谢冯红同学在组织切片中提供的帮助：感谢武汉大学基础医学院陈宝萍老师在 组织超薄切片和透射电子显微镜实验中提供的技术支持；感谢水生所分析测试中 心的所有老师在仪器使用中提供的技术支持。 最后，感谢我的家人对我的支持和鼓励，还有所有支持和帮助我的朋友、同 学们，谢谢你们! 辜麒麟 2014年5月 II 摘要饥饿诱导斑马鱼Slc7a3a突变体产生脂肪肝的分子机制 摘要 饥饿诱导斑马鱼Slc7a3a突变体产生脂肪肝的分子机制 摘 要 肝脏在调控脂肪代谢，如脂肪物质的吸收、氧化分解和新的脂肪酸合成中起 着重要作用。长期饥饿能够导致人类和模式动物产生肝脏脂肪病变，然而目前仍 是不清楚饥饿导致的脂肪肝的分子机制。 非酒精性脂肪肝是一种常见的慢性肝脏疾病，主要是由于肝脏中的脂肪代谢 出现异常，大量脂肪物质在肝细胞中积累，造成肝脏发生脂肪病变。非酒精性脂 肪肝能进一步病变成非酒精性脂肪性肝炎，肝脏纤维化(肝硬化)，并最终恶化 成肝癌。肝细胞内脂肪积累的原因主要有以下几个方面：(1)肠道吸收大量的乳 糜微滴；(2)肝脏中新合成的脂肪物质增多；(3)脂肪组织分解产生的自由脂肪 酸大量涌入肝脏；(4)肝脏中脂肪物质外输减少；(5)肝脏脂肪酸氧化分解减少。 我们实验室之前已经成功建立了一个转基因斑马鱼品系，一个单拷贝的外源 基因序列整合到slc7a3a基因的第二个外显子内，造成slc7a3a基因突变。由于 Slc7a3a蛋白在细胞内是潜在的精氨酸转运载体，精氨酸是动物细胞中具有多种 用途的氨基酸之一，是蛋白质、一氧化氮、尿素、多胺、脯氨酸、谷氨酸、肌酸 和胍丁胺合成的前体物质。精氨酸代谢的异常与一系列