模式生物-果蝇-免费版PPT.pptVIP

Flp/FRT介导的突变体克隆 Cre/loxP UAS/Gal4(Gal80) 利用UAS/Gal4系统易位表达eyeless基因 果蝇中基因改造与调控元件的结合应用 RNAi+Gal4/UAS GAL4 driver + UAS eyeless RNAi GAL4 driver + UAS-fmiRNAi 被称为“遗传学之父”。 用果蝇证实了孟德尔定律，发现了果蝇白眼突变的性连锁遗传，提出了基因在染色体上直线排列以及连锁交换定律。 1933年诺贝尔生理学或医学奖。 Thomas Morgan 托马斯-摩尔根 摩尔根的学生，被誉为“果蝇的突变大师”。 发现X线照射可引起基因突变，为人工诱导突变开辟了重要途径。 1946年诺贝尔生理学或医学奖。 Hermann J. Muller 赫尔曼-缪勒 埃德华·刘易斯 克里斯蒂纳·福尔哈德 埃里克·威斯乔斯 以果蝇为实验材料，筛选了上百个控制胚胎早期发育的基因，揭开了胚胎如何由一个细胞发育成完美的特化器官的遗传秘密。获得了1995年诺贝尔生理学或医学奖。 BX：「双胸」突变果蝇 基因的功能与身体发育有关 「同源异型转变」（homeotic transformation）：将身体一部分构造变为另一相似构造的转变。造成这类转变的基因就称为同源异型基因（homeotic gene），主要为转录因子。 琳达·巴克 理查德·阿克塞尔 阿克塞尔和巴克以果蝇为研究材料，从分子层面到细胞组织层面清楚地阐明了嗅觉系统的作用机理，因而获得2004年诺贝尔生理学或医学奖。 果蝇的基本特点 果蝇相关的研究成果 果蝇的遗传操作工具 果蝇在人类疾病机制研究中的应用 果蝇遗传学方法 正向遗传学 反向遗传学 自发突变 化学试剂诱变 射线诱变 转座子介导的突变 转座子剪切 转基因 RNAi 基因打靶 Phenotype Mutant Gene white1118 X chromosome EMS Phenotype Mutant Gene white X chromosome * * (EMS, 甲基磺酸乙脂) (MMS, 甲磺酸甲酯 ), (ENU, 乙烷基亚硝基脲) (TEM,三乙基三聚氰胺) ( ICR-170, 吖啶诱变剂) (DEB, 二环氧丁烷) (Formaldehyde, 甲醛) 化学诱变剂 EMS 在果蝇基因组中平均每400kb可诱导一个点突变，这一点突变80%是G/C到A/T的转换。 X射线 诱导突变 诱导有丝分裂交换 引起体细胞辐射损伤 转座子：可移动的遗传因子 1983年诺贝尔生理学及医学奖 Barbara McClintock 1902-1992 Corn (maize) varieties 转座子诱导的突变 反向遗传学 转座子剪切 转基因 RNAi 基因打靶 正向遗传学 具有随机性，常常不能得到实验需要的突变体。 转座子剪切 转化 P-element介导的转基因 带有P-element及标记基因的质粒+del2-3质粒（提供转座子酶） 显微注射 受精卵的准备 Syncitial blastoderm Germ cells phiC31介导的定点转基因 fC31 Co-injection of attB-construct DNA with fC31 mRNA into attP embryos ~ 10-50% integration rate transgenic insertion attP attB attR attL RNAi 基因打靶 目标基因的断裂可增加同源重组发生的概率 果蝇基因打靶杂交流程 FokI nuclease domain (Fn) FokI nuclease domain (Fn) ZFN TALEN CRISPR/Cas9 基因打靶与定点整合的结合 Genomic Engineering SIRT (site-specific integrase-mediated repeated targeting) IMAGO (integrase-mediated approach for gene knock-out) 果蝇中常用的基因调控元件 Flp/FRT Cre/loxP UAS/Gal4(Gal80) Flp/FRT Flp white FRT FRT X 中华民族有着五千多年的文明历史，中华民族在世界上是一个非常卓越和伟大的民族。我们有过繁荣昌盛的唐朝，有过强盛无比疆域辽阔的汉朝和元朝，更有灿烂美丽的唐、宋文化 中华民族有着五千多年的文明历史，中华民族在世界上是一个非常卓越和伟大的民族。我们有过繁荣昌盛的唐朝，有过强盛无比疆域辽阔的汉朝和元朝，更有灿烂美丽的唐、宋文