急性髓系白血病患者中期因子（MK）表达的临床意义及其与凋亡的相关性研究-内科学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 急性髓系自血病患者中期因子明的表达的临床意 义及其与凋亡的相关性研究 摘要 目的:中期因子 (Midkine ，MK) 是一个新发现的肝 素结合性生长因子。分子量为 13KDa。其多种生物学活性 与癌有关:首先， :t\1I(可使 NIH3T3 细胞发生肿瘤转化; 其次，如0至促进细胞的生长、迁移和血管新生，并具有抗 凋亡作用。近几年国外研究报道， MK 在多种人类肿瘤组 织中呈高表达，并参与肿瘤发病过程。急性白血病是血液 系统最常见的恶性肿瘤之一，在髓系白血病细胞株中发现 有中期因子 (MK) 异常表达，其可能参与白血病的发生、 发展过程。对急性髓系白血病 (AML) 患者表达情况的临 床研究目前尚未有报道。本实验研究旨在检测 AML 在初 治、化疗缓解后、复发时 MK 基因与蛋白表达水平变化， 明确其基因表达是否与蛋白表达平行:探讨 MK 的表达水 平与 AML 的 FAB 分型及预后的关系:检测 bcl-2 基因表 达水平，推断其与 MK 表达的相关性，探讨 MK 抗凋亡的 机制;同时，检测 mdr-l 基因表达水平，分析 MK 与白血 病细胞耐药的相关性。从而推断 MK 在 AML 发生、发展 中的作用及其作用机制，以期为成人急性白血病的临床治 疗、判断预后及转归提供新的思路。 方法:应用逆转录，聚合酶链反应( reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR) 方法检测 、 中文摘要 中文摘要 65 例急性髓系白血病 ( AML) 患者〈包括初治、复发和 缓解期患者)、正常人的骨髓单个核细胞和髓系 臼血病细 胞株 K562 和 HL-60 的 MK 、bcl-2 、 mdr-l mRNA 的表 达水平:随机选取部分 患者和正常人，取骨髓分 离单个核 细胞，于盯MIl640 培养基 中孵育 24 小时，应用蛋 白印 记 CWestem blot) 方法检测培养细胞的 MK 蛋臼表达，同 时检测髓系细胞株 K562 和 HL-60 中的 MK 蛋白表达， . 明确 MK 基因水平和蛋白水平是否表达一致，并观 察 MK 与白血病细胞凋亡和临床耐药的关系。 结果: 1.初治 AML 患者中， MK 的 mRNA 表达的 阳性率为 38% ，平均表达水平为0.331 ;正常对照组在同 等实验条件下未检出 MK mRNA 表达，表达率为 0，两组 表达率之间差异具有显著性 (P0.05 )。在髓系自血病细 胞株 K562 中检测到 MK mRNA 高水平表达(表达水平是 0.864) 在 HL-60 细胞株中 MK mRNA 无表达。用蛋白印 记法在表达 MK mRNA 的标本中，以及 K562 细胞系中均 检测到 MK 蛋臼的存在，而在皿 -60 细胞株中未检测有 MK 蛋白表达。 2. 在 15 例 AML 缓解期患者， MK 的 mRNA 的表 达率为 13.33%，平均表达水平为0.067 ，与初治组相比有 显著性差异， PO.05 。用蛋白印记分析未检测到缓解期患 者杳 MK 蛋白水平表达。 3. 在 15 例复发 AML 的患者中， 6 例有 MK 的mRNA 表达，表达率为 40% ，平均表达水平为0.374，明显高于 缓解期患者，具有显著性差异 (P0.05 )。与初治组相比 无统计学差异。 2 中文摘要 中文摘要 4. MK 表达增高与 AML 的 FAB 分型无明确相关性 (P0.05 )。 5. 按照 MK 的表达情况将 50 例初治 AML 病人分成 两组: MK 阳性组和 MK 阴性组。 MK 阳性组患者完全缓 解率为 63. 16% (12/19 )声 MK 阴性组的完全缓解率为 93.55%(29/31)t 两组之间具有显著性差异 (P=0.0103λ 显示 MK 基因阳性表达与 CR 率呈负相关。按照耐药标准 将 65 例成人患者分为多药耐药组和临床敏感组，耐药组 26 例?敏感组 39 例。在 26 例耐药组中 15 例 MK 表达阳 性， 11 例为阴性， MK 表达率为 57.69%; 在 39 例敏感组 中 10例 MK 表达阳性， 29 例为阴性，MK.表达率为 25.64% ， 明显低于耐药组，提示 MK 高表达者预后不良。 6.50 例初者患者的缓解率为 82% (41/50)。随访其中 的 35 例患者并按照 MK 的表达情况将其分为两组: MK 阳性组和 MK 阴性组。5 例 MK 阳性患者均在 1 年内复发 F 30 例 MK 阴性患者中有 12 例复发声两组相比， MK 阳性 组无 1 例持续缓解， MK 阴性患者复发率为 40% ，提示 MK 离表达者容易复发。 7. AM