激活素抑制素卵泡抑素系统在卵母细胞成熟过程中的影响机制及其在未成熟卵母细胞体外成熟技术中的应用-临床医学 妇产科学专业论文.docxVIP

中国医学科学院中国协和医科大学博士研究生论文英文缩写 中国医学科学院中国协和医科大学博士研究生论文 英文缩写 英文全称 中文全称 IⅧ in vitro oocyte maturation 卵母细胞体外成熟 CoC cumulus—oocyte complexs 卵丘．卵母细胞复合物 GV germinal vesicle 生殖泡 GVBD 生殖泡破裂 MII metaphase II 第二次减数分裂中期 PBl first polar body 第一极体 HCG human chononic gonadotrophin 人绒毛膜促性腺激素 ACT activin 激活素 INH inhibin 抑制素 FS follistatin 卵泡抑素 EGF epidermal growth factor 表皮生长因子 FSH 卵泡刺激素 BSA bovine Serum albumin 牛血清白蛋白 LH 黄体生成素 IVF—ET in vitro fertilization-embryo implantation体外受精一胚胎移植 M I metaphase I 第一次减数分裂中期 PN pronuclei 原核 TGF p transforming growth factor p 转化生长因子B 裸卵 孕马血清促性腺激素 SPS 鸵Tllmprotdn substitute 血浆蛋白代用品 HTF human tubal fluid 人输卵管液 9 中国医学科学院中国协和医科大学博士研究生论文激活素．抑制素．卵泡抑素系统在卵母细胞成熟过程中的影响机制 中国医学科学院中国协和医科大学博士研究生论文 激活素．抑制素．卵泡抑素系统在卵母细胞成熟过程中的影响机制 及其在未成熟卵母细胞体外成熟技术中的应用 中文摘要 目前人类尚无法完整揭示卵泡生长发育过程中的调控机理，主要原因在于对 卵巢内部因子作用机制了解不清。激活素一抑制素一卵泡抑素 (activin-inhibin—follistatin，AcT—INH—FS)系统是最重要的卵巢内部因子 之一，其卵巢内部的旁自分泌作用机制有待阐明。 近年来人类未成熟卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation，IvM)技术在 不育症治疗中显示出重要的I晦床价值。但其妊娠率、种植率以及自然流产率尚不 理想，主要原因在于尚未建立能够使未成熟卵母细胞同步获得细胞核和细胞浆成 熟的培养体系。ACT-INH—FS作为卵泡体内成熟微环境中的重要因子，可能也是 IⅧ培养体系中不可或缺的组分。 本研究目的是通过以下三方面内容，探讨激活素一抑制素一卵泡抑素系统在卵 母细胞成熟过程中的旁分泌作用机制及其在人类不成熟卵母细胞体外成熟技术 中的应用价值。 一、 激活素一抑制素一卵泡抑素系统对卵母细胞成熟及胚胎发育潜能的影 响 二、 激活素一抑制索一卵泡抑素系统卵巢局部生理作用的阶段性与交互性 三、 卵母细胞体外成熟培养体系的安全性相关研究 第一部分 激活素．抑制素．卵泡抑素系统对卵母细胞成熟及 胚胎发育潜能的影响 目的：探讨激活素一抑制素一卵泡抑素系统在小鼠生发泡(Gv)期卵母细胞 体外成熟及早期胚胎发育中的的影响机制。方法：3—4周龄昆明系雌性小鼠腹腔 注射PMSG后48小时，获取Gv期卵母细胞随枫分入以下八组。对照组采用 HTF+IO％SPS；试验组分别为：lOOng／ml ACTA；lOOng／m1ACTA+IOOng／m1FS： lOOng／mlINHA：lOOng／mlIN}{A+lOOng／m1FS：lOOng／m1ACTA+INHA：lOOng／m1ACTA+I OOng／mIlNHA+IOOng／mlFS；lOOng／ml FS。Gv期卵母细胞体外培养16-18小时后， 中国医学科学院中国协和医科大学博士研究生论文M 中国医学科学院中国协和医科大学博士研究生论文 M lI期的卵母细胞进行体外受精，观察ACTA—INHA-FS对Gv期卵母细胞生发泡破 裂(Gv叻)、第一极体(PBI)排出及受精率、卵裂率、囊胚形成率的影响。使用 MitoTrackerRED荧光探针对ACTA组以及ACTA+INHA合用组MlI期卵母细胞内活 性线粒体数目及分布进行检测。结果：(1)ACTA、ACTA+INHA、单独使用FS均 可显著促进GV期卵母细胞GVBD发生率(P(O，05)。(2)ACTA、ACTA+INHA、INHA 均可显著促进MII期卵母细胞发生率(P0．05)，(3)INHA组受精率低于对照组 (P0．05)，其余各组与对照组相比，受精率无明显差异(PO．05)。(4)ACTA、 INHA、ACTA+INHA组8细胞及囊胚形成率均显著高于对照组(PO．05)。(5)FS 可以特异性拮抗ACTA