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澄清型管式分离机 SSC600-NG三足式沉降离心机 19XKZ全自动压滤机 4、固体物质的前期预处理技术 由于生物反应液的粘度很大，直接分离往往比较困难，因此，常常对其进行预先的前期处理，来提高分离效果。 常见的预处理技术有：（1）使细胞老化凝聚成团，（2）加热，（3）改变PH值，（4）添加化学物质促进凝聚，如加入高分子电解质、氯化钙、胶态粘士。 （二）初步分离 进一步把已经分离的溶液浓缩，提高目的产物浓度的方法，称为初步分离。 初步分离的具体方法可以分为： 1、蒸发 2、萃取 3、沉淀 4、膜分离 1、蒸发 蒸发是通过加热，使溶液中的水经过汽化除去要提高溶质浓度、为溶质的析出创造条件的一种操作方法。 各种代谢物，如氨基酸、抗生素、酶都可以进行蒸发操作。 由于生物产品大多数是热敏性物质，所以物料在蒸发器内的停留时间必须尽可能短，同时，还应该昼避免局部液体过热。 LG系列离心式刮板薄膜蒸发器示意图 蒸发设备（1）连续流动膜式蒸发器，（2）长管膜式蒸发器，（3）强制膜式蒸发器，（4）离心膜蒸发器。 2、萃取 萃取是通过物质在2种溶液之间不同的溶解度，来实现分离的操作方法。 萃取的分类 （1）有机溶剂萃取 （2）双水相萃取 （1）有机溶剂萃取 许多抗生素都能够溶解在有机溶剂之中，如乙酸乙酯、乙酸丁酯、因此，通过萃取，可使得抗生素从水相进入有机相之中，从而实现分离。 由于抗生素在有机溶剂之中极不稳定，因此，在保证萃取效率的前提条件下，必须尽量缩短操作时间。 有机溶剂萃取设备可使用Podbielniak离心萃取机。 SFT-150超临界萃取反应仪 利用萃取法来提取抗生素，具有质量好、收率高、速度快的优点。 双水相萃取法，目前用于进行酶、和蛋白质的提取工艺。 （2）原生质体融合法 Pesti于1979年提出用原生质体融合法来提高青霉素的产量。 我国四川抗生素研究所于1983年通过原生质体融合法生产麦迪霉素，产量提高40%。 （3）体外DNA重组法 采用体外DNA重组技术来改良抗生素生产菌。 英国D.Flopwood首次在链霉菌之间进行了基因转移。产生出世界首创的杂合抗生素-------麦迪紫红素。 六：发酵生产过程 生产用菌种-------- 原始材料-------- 培养基------ 程序------- 生产细则------- 以青霉素为例讲解 （1）青霉素（penicillin） 所用菌种---黄青霉菌 原始材料---α-氨基已二酸、半胱氨酸、缬氨酸。 发酵方法----加前体物质的深层发酵法。 青霉素发现者弗莱明 沙土管菌种 ↓ 转移到固体琼脂斜面培养基上，24℃培养5-6天，获得芽孢 ↓ 芽孢悬浮于无菌水中，进行摇瓶培养 ↓ 进入移种瓶培养 ↓ 进种子罐，接种量为5%-10% ↓ 进繁殖罐，28℃培养48-96小时 ↓ 进入发酵罐，开始生产。 ↓ 鼓式过滤 ↓ 第一次萃取器 ↓ 纯化柱 ↓ 第二次萃取器 ↓ 第三次萃取器 ↓ 真空结晶釜 ↓ 瓷过滤器 ↓ 结晶洗涤釜 ↓ 真空干燥器（结束） 程序 （1）使用消沫剂，由于发酵过程中产生大量的CO2，会产生大量泡沫。可采用植物油、豆油、合成消沫剂进行消沫处理。 （2）温度控制在24-30℃、PH值控制在6. 8--7.2。 （3）应该注意控制残糖量、还原糖量、PH值、氨、氮、溶解氧量。 （4）发酵过程中要注意通气搅拌，所通入的空气必须是无菌的。 （5）发酵罐必须保持正压（20-30kPa），以防罐外不洁净的空气流入。 （6）目前国际上青霉素发酵的水平已经达到8万多单位/ml，相当于50g/L。 生产细则 七：灭菌技术 灭菌操作是为了保证杂菌不进入工业发酵系统。 （一）灭菌项目 （二）灭菌方法 （三）灭菌的矛盾之处 （四）具体的灭菌技术 （一）灭菌项目 1、在投入生产之前，必须对设备、管道进行彻底清洗、和严格灭菌。 2、对通入的培养基、通入的空气进行先行灭菌。 （二）灭菌方法  2、化学法 1、加热法 3、辐射法 4、过滤法 （三）灭菌的矛盾之处 对杀灭细菌的同时 1、培养基中的营养成份也随之遭到分解和破坏。 2、杀死杂菌的同时也杀死了工程细菌。 （四）具体的灭菌技术 可分为6种技术： 1、间歇灭菌法 2、加热灭菌法 3、连续灭菌法 4、空气加热灭菌法 5、空气过滤灭菌法 6、营养物质瞬时高温杀菌法 1：间歇灭菌法 又称为分批灭菌，是指将培养基放在发酵罐内，然后连罐加热到规定的灭菌温度。 （1）灭菌方法 （2）注意事项 （3）间歇灭菌法的优点 （1）灭菌方法 间歇灭菌的操作过程分为3个过程： 加热----保温维持----冷却。 这些不同的阶段，均能够起到灭菌的作用。然而，在灭菌过程中，保温杀菌的作用是主要的，冷却