分子生物学幻灯片-1-染色体与DNA.pptVIP

2 染色体与 DNA;2.1 染色体;2.1.1 染色体概述;人类染色体显微结构图;除外观结构不同之外，在细胞内的存在方式也不同： 原核细胞染色体外裹着稀疏的蛋白质，其中一部分与DNA的折叠有关，另一些则参与DNA复制、重组及转录过程。 真核细胞的染色体中，DNA与蛋白质完全融合在一起，其蛋白质与相应DNA的质量比约为2:1.;染色体特征：分子结构相对稳定；能够自我复制，使亲子代之间保持连续性；指导蛋白质的合成，控制整个生命过程；产生可遗传的变异。 真核细胞DNA的转录和翻译在不同的空间和时间上进行，其基因表达的调控不仅与DNA序列有关，也与染色体的结构有关。;1. 蛋白质;组蛋白的特性 1. 进化上的极端保守性。不同种生物组蛋白的氨基酸组成十分相似。特别是H3、H4，牛、猪、大鼠的H4完全相同。 2. 无组织特异性。 仅发现两个例外（鸟鱼两栖红细胞H1-H5，精细胞鱼精???白） 3. 肽链上氨基酸分布的不对称性。 N端碱性氨基酸 C端疏水氨基酸 4. 组蛋白的修饰作用 甲基化、乙酰化、磷酸化、多聚ADP糖基化等 5. 富含赖氨酸的组蛋白H5。 只存在于鸟类、两栖类等含有细胞核的红细胞中。 ; 非组蛋白 包括酶类和细胞分裂有关的蛋白（收缩蛋白、骨架蛋白、核孔复合物蛋白、肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白） 高速泳动蛋白（high mobility group protein, HMG蛋白）能与DNA结合，也能与H1作用，可能与超螺旋结构有关。 DNA结合蛋白 可能是一些与DNA复制或转录有关的酶或调解物质。 A24非组蛋白 C端与H2A相同，功能不详 ;2. 真核生物基因组DNA;不重复序列 一个或几个拷贝，占DNA总量的40-80%，序列长约750-2000bp. 结构基因基本上属于不重复序列. 单拷贝基因也可以合成大量蛋 白：蚕丝心蛋白 DNA-104 mRNA-109 protein 中度重复序列 重复次数10-104，占DNA总量的10-40%，编码rRNA、tRNA和某些结构蛋白。中度重复序列往往分散在不重复序列之间。 高度重复序列 卫星DNA(satellite DNA )，只在真核生物中发现，占基因组的10-60%，由6-100个碱基组成。高度浓缩，异染色质的组成部分。大多位于染色体着丝粒。不转录，功能不明，可能与染色体的稳定性有关。;核小体——染色体DNA的一级包装 染色质螺线管(30nm fiber)——二级包装 染色质纤维环—三级包装;染色质和核小体;染色质的电子显微镜图和X线衍射图 微球菌核酸酶（Micrococcal nuclease） 染色质后电泳，被保留的DNA片段均为200bp基本单位的倍数。;核小体单体被微球菌核酸酶处理后，随着时间延长，其降解产物(DNA片段)会逐渐缩短，从200bp降至146bp，至此很难再进一步降解。 这种稳定结构为核心颗粒，它是由147bp的DNA片段和H2A、H2B、H3和H4各2分子组成。;;核小体是一种串珠状结构，由核心颗粒和连结线DNA两部分组成，可描述如下：①每个核小体单位包括约200bp的DNA、一个组蛋白核心和一个H1；②由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体，构成核心颗粒；③DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面，每圈80bp，共1.75圈，约146bp，两端被H1锁合；④相邻核心颗粒之间为一段60bp的连接线DNA。 核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一步，收缩至原尺寸的1/7.;染色质螺线管(30nm fiber);螺线管纤维相隔一定间距的某些区段被拉拢固定在蛋白轴上，从而产生了许多从骨架上伸出的纤维环(loops)。;螺线管纤维缠绕在非组蛋白构成的中心轴(central axis)骨架（支架蛋白质）上形成染色质纤维环。 染色质纤维环是在螺线管纤维基础上的更高一级包装。 从螺线管纤维环到包装形成染色体是DNA压缩程度最高的阶段，估计在200~240倍。 纤维环的形成是基因表达较理想的结构，这些环状区是基因表达的活性单位所在。因为纤维环DNA比其它区域有更伸展的结构。;染色体(chromosome)的形成;;真核生物基因组的结构特点 基因组庞大 存在大量重复序列 大部分为非编码序列（90%） 真核生物与细菌、病毒最主要区别 转录产物为单顺反子(见P452页解释) 真核基因是断裂基因，有内含子 存在大量顺式作用元件（启动子、增强子、沉默子） 存在大量的DNA多态性 有端粒结构;2.1.3 原核生物基因组;质粒DNA:染色体外的DNA分子，其大小范围在1kb至200kb以上不等，以超螺旋状态存在于宿主细胞中。 质粒