环氧合酶-2在视网膜母细胞瘤中的表达-眼科学专业论文.docxVIP

华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 硕士学位论文 环氧合酶一2在视网膜母细胞瘤中的表达 华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 硕士研究生： 刘柳 指导教师：张晓农教授 摘要 【目的】 视网膜母细胞瘤(Rctinoblastoma，Rb)是危及婴幼儿视力及生 命最常见的眼内恶性肿瘤。近几年，国内外诸多研究表明环氧化酶-2 (cyclooxygenase，2。COX-2)参与肿瘤的发生和进展，而且非甾体类抗炎药通过 抑制COX-2的表达。具有预防和治疗肿瘤的作用。我们检测视网膜母细胞瘤中 COX-2蛋白的表达情况；测定COX．2选择性抑制剂NS．398对视网膜母细胞瘤 细胞增殖活性和细胞周期的影响，来探讨COX．2在视网膜母细胞瘤中发生发展 中的作用，选择性COX-2抑制剂NS．398对视网膜母细胞瘤细胞的作用机制。 【方法】 应用链霉亲和素蛋白．生物素酶标免疫组织化学方法(1abelled streptavidin biotin method，LSAB)，对37例I№组织5例正常视网膜组织常规石 蜡标本中COX-2的表达进行测定，按视网膜母细胞瘤细胞分化程度和视神经浸 润进行分组，通过I-IPIAS．1000型高清晰度彩色病理图文分析系统测定平均吸光 度A值，进行结果分析。 培养视网膜母细胞瘤细胞HXO．Rb“，用免疫荧光法检测COX-2在该细胞的 表达和定位；COX．2选择性抑制剂NS．398浓度分别为12．5 umol／L，25 umol／L· 50 um01／L，100 umol／L，200 umol／L作用于视网膜母细胞瘤细胞HXO·Rb44，分 别培养24、48、72小时，应用MIT法观察其对细胞增殖的影响作用；用流式细 胞仪分析Ns．398浓度为100 umol／L作用细胞48小时后对HXO·Rb44细胞周期 的影响。 【结果】 COX一2在Rb中的阳性表达率为75．7％(28／37例)，与Rb的分 化程度无关(P0．05)和视神经浸润无关(P0．05)。COX～2在5例正常视网膜 华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 硕士学位论文 组织中表达呈阴性。 COX·2在HXO-Rb44呈阳性表达，主要定位于胞浆。NS．398对HXO．Rb。 的抑制作用具有时间及剂量依存性。NS．398不同浓度组和时间组之间A值不同 (P0．05，P0．05)，50umoI／L,100umoI／L,200umol／L试验组与对照组差异有显著 性(po．05，p0．01)。NS一398浓度为100umol／L作用HXO-Rb44细胞48小时后， Go／G1期细胞比例增加，s期和M期细胞比例减少，HXO．Rb“细胞被阻滞于Go／G1 期，使增殖减慢。 【结论】 通过实验我们发现：①COX-2可能参与了视网膜母细胞瘤的发 生，与肿瘤的形成有关。②COX-2有可能成为视网膜母细胞瘤化学治疗的新靶 点。 【关键词】视网膜母细胞瘤还氧合酶一2 NS-398免疫组织化学免疫荧 光法流式细胞仪细胞周期 兰量!堕!!!兰塑堕堕堂堕 兰量!堕!!!兰塑堕堕堂堕 堡主兰堡垒奎 A study of expression of cyciooxygenase．2 in retinoblastoma Uu Liu，Zhang Xiaonong．Department of Ophthalmology,ronNi Hospital． Ton舀i Medical College，Huazhong University of Science and Technology,Wnhan 430030，China Abstract Objectives Retinoblastoma is the most common malignant introcular tumor that threatens the vision and life of childhood．Chemotheropy has been more and more used in the treatment of retinoblastoma since the late 1980’S．Recent studies have shown increased levels of cyclooxygenase一2(cox一2)in a variety of