氯霉素胶体金试纸条的研制-食品科学专业毕业论文.docxVIP

l l 1呲4帆m叭mm眦灿44哪 {Y1 942628 摘要 摘要 氯霉素是一种高效广谱抗生素，常用于治疗人体和动物的细菌性疾病，但 是氯霉素残留对人体有较强的副作用，所以对于动物源性食品中的氯霉素残留 的检测显得尤为重要。传统氯霉素残留分析不乏灵敏度高，准确性好的检测方 法，但很难满足现场、快速的检测需求。故建立快速、高效的检测方法并制备 出相应的产品是大势所趋。 本研究为了提高胶体金试纸条的灵敏度和稳定性，对不同粒径的胶体金试 纸条工艺、样品前处理方法进行了优化，具体研究内容如下： (1)胶体金试纸条工艺优化 利用氯霉素胶体金免疫层析分析方法制备氯霉素胶体金试纸条，利用柠檬 酸三钠法分别制备20、30、40nm胶体金，并分别优化三种胶体金试纸条的制备 工艺条件。结果发现，用同样的方法标记三种胶体金标记氯霉素单克隆抗体效 果没有明显差异，只是标记蛋白量略有不同；三种金标抗体纯化离心速度分别 为10000、8000、8000r／rnill，粒径越小离心速度越大；三种粒径的胶体金可以共 用试纸条材料，只是在硝酸纤维膜上抗原、羊抗鼠IgG最佳包被浓度略有不同。 (2)试纸条性能测试 20、30、40咖胶体金试纸条灵敏度依次为7、3、9 n酌nL；与青霉素、庆 大霉素、链霉素、四环素的交叉反应均大于200n卧IlL；干燥保存2个月；30姗 的胶体金制备的胶体金试纸条在稳定性、灵敏度方面都明显优于20nm和40呦。 (3)实际样品检测 利用30llIIl胶体金生产氯霉素胶体金试纸条，并对实际样品进行检测，成品 试纸条检测结果稳定、可靠。与传统样品前处理方法相比，固相萃取技术不但 能较好的从样品中提取目标物，且达到富集的目的，从另一个角度提高检测方 法的灵敏度。 关键词：氯霉素，胶体金，粒径，ELISA，前处理，固相萃取 n AbSt豫ctAbstract AbSt豫ct Abstract CMo瑚nphemcol(CAP)is觚e毹ctive broad—spe咖加觚tibiotics coIIlrnonly 、7l，：Ilich used in the乜．eatInent of hllman and aniInal bacterial diseases．But it h嬲 adver∞ e任．ect agaillSt hlmlan bodies．Therefor，it is illlpoItant nlat detct Cmo咖lphemcol in food of a渤al origill．11lere躺m觚y lli曲sensitiV慨good ∞curacy of detection memods allalysis matlls for cldor锄叩hcnicol in t11e 仃aditionm．But it is dimcun t0 meet tl圮on-site，瑚【pid detection needs．A r印id， emciem detection methods觚d也e C0rresponding prodllct prepared is tlle treIld． 111雠s study，t0 inl—ove廿le senSitiVit)r锄d s切面ilit)r of C0lloidal gold嘶p， di彘rent size colloidal gold teSt S仃ip and s锄叩le preparation I鹏mod is optirnized．the Speci丘c comcnts arc嬲folIows： (1)0ptimi刎on of colloidaLl gold sn．ip cr蚯 AccormI培t0 t11e principle of iInmunochromato黟aphy aIld pr印aration of c11lor觚lpheIlicol colloidal 90ld test虹p．Colloi捌gold panicles w嬲preparedby sodium citrate向阳Ctionsize of whiChⅥ傩20nm，30m锄d 40胁respeCtively．Each sizc of舭colloi蚴gold panicles were uSed t0 prepare也e colloidal 90ld Clllo唧heIlicol test strips and tlle tecllnical Condition of t11eSe嘶ps were optimized． The n埘e colloidal gold labeled monoclonal antibody c觚uSe仕屺s