课件：鼠疫病原学及鼠疫实验室管理和运行资料.ppt

（四） 实验室操作规范 从事鼠疫微生物的操作，都应遵循下列基本原则： （1）所有操作人员必须经过专业技术培训，经考核批准才能工作。 （2）熟悉各种仪器的操作步骤和要点，进行正确的操作和使用。 （3）应掌握各种感染性物质操作的一般准则和技术要点。严格按照鼠疫操作手册进行操作。 （五）鼠疫强毒实验室操作规程 1、凡是鼠疫材料、疑似材料的检验或鉴定等项工作必 须在鼠疫强毒实验室内进行。 2、鼠疫强毒实验室操作，需有2名工作人员同时进入。 3、强毒区工作前，用紫外灯照射半小时消毒工作区域。 4、工作人员按要求着装，才能进入强毒区域。 5、进入实验室 （1）进入实验室时，每进入一道门，应先将此门关好，再开启下一道门。 （2）实验过程中所需要的其它物品应从传递窗送入。 （3）进入实验室后，关闭紫外灯。 （4）做好开始实验的各项准备。 6、实验操作 1）凡是鼠疫材料及疑似材料的检验或鉴定，包括菌种开 封、细菌分离、培养或其它操作，均应在实验室生物安 全柜内进行。 2）在进行实验工作之前，工作台面先用消毒液灭菌并铺 放浸有消毒液的毛巾，随时进行工作台面的消毒。 3）进行细菌操作时，使用一次性接种环或使用接种环 电热灭菌器燃烧灭菌接种环，避免菌液或菌块飞溅。 4）稀释菌液时，将吸管插入试管或烧瓶底部，用吸球缓 慢打击菌液，避免产生气泡。 5）实验中需使用酚、氯仿等腐蚀性试剂时，应在乳胶套外 加戴一次性塑料手套。 6） 离心时，应使用双盖封闭式离心机和全封闭试管，每管 离心液总量至少低于最高容量1个刻度单位；平衡时不得有菌 液渗漏到套管中，离心机使用后立即用消毒液擦洗消毒。 7） 进行实验操作时，勿用手直接对接或拔开注射器和针头 ，以免划破皮肤或无意接种。 8）禁止在空气中直接排放含有菌液注射器内的气泡，以免 形成气溶胶。 9） 实验中使用的利器，应用利器盒直接收集处理。 10）接种了强毒鼠疫菌的动物必须饲养在封闭的实验动 物室内，并有明确的实验记录 11）未分离到鼠疫菌的动物尸体必须在实验室内用5%来 苏儿浸泡5昼夜，然后深坑掩埋。染疫动物尸体必须5%来 苏儿浸泡后，再高压灭菌后深埋。 12）工作完毕，检查各仪器设备是否恢复零位，做好使 用记录。 13）实验操作结束后，用消毒液消毒、清理工作台面、 地面等，并详细记录所做的工作内容。 7、出实验室及脱个人防护装备。 1）先用消毒液浸泡手套、长筒胶靴5分钟。 2）用喷雾器从上至下喷雾消毒防护服。 3）脱个人防护装备并按要求进行消毒灭菌。 4）最后使用75%酒精对手部、面部及暴露部位擦拭消毒，用3%硼酸水漱口后离开实验室。 8、关闭实验室，打开实验室紫外灯进行30分钟消毒。 （六）实验室操作防护和个人防护： 1、实验室操作防护 （1）进行实验室操作，任何时候都必须戴口罩和防护眼镜、穿着反背隔离防护服，穿防护鞋袜，不得裸露腿部和脚趾，必要时穿连体衣。 （2）在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完后，先消毒再摘除，随后必须洗手。 （3）在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。 （4）为了防止眼睛或面部受到洒溅物、碰撞物或人工紫外线辐射的伤害，必须戴安全眼镜，必要时戴面罩（面具）或其他防护装备。 （5）严禁穿着实验室防护装备离开（如去餐厅、办公室、图书馆、员工休息室和卫生间等），更不能把防护器材带回家。 （6）禁止在实验室的准备间和操作间里进食、饮水、吸烟、化妆、处理隐形眼镜和储存食品和饮料。 （7）在实验室内用过的防护服要消毒后再清洗，不得和日常服装放在同一柜子内。 2 个人防护除符合BSL－2的要求外，还应该符合下列条件： （1）工作人员在进入实验室时必须使用个体防护装备，包括两层防护服、两层手套、生物安全专业防护口罩（不应使用医用外科口罩等），必要时佩戴眼罩、呼吸保护装置等。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。 （2）在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。实验室区域内应配备应急药品。 （3）个人防护用品的穿脱顺序 穿脱顺序应根据使用的防护服而定，一般原则是先穿后脱，后穿先脱，严格区分洁净品和污染品。 （1）穿防护用品顺序：穿内防护衣、裤-穿靴套-穿胶靴-戴帽子-戴口罩-戴手套-戴猴帽 -穿外防护衣-戴大口罩-戴手套-戴防护眼镜或面罩。 （2）脱防护用品顺序：全身喷雾消毒-消毒液泡手-摘下防护眼镜或面罩-脱外防护服-摘下大口罩-摘下猴帽- 摘外层手套- 摘帽