慢性氟中毒大鼠骨组织中骨活素表达意义的研究-病理学与病理生理学专业毕业论文.docxVIP

贵阳医学院 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 PAGE PAGE 10 慢性氟中毒大鼠骨组织中骨活素(OA)表达意义的研究 专 业：病理学与病理生理学 研究生：徐文兴 导 师：于燕妮 教授 易 韦 教授 【摘要】 目的 通过研究慢性氟中毒大鼠骨组织及骺板软骨病理形态计量学与OA蛋 白及其mRNA表达，初步探讨OA在氟骨症发生机制中的作用，为地方性氟中毒的诊 断、预防和治疗提供理论依据。 方法 36只SD大鼠随机分为3组，每组12只，组内雌雄各半。对照组饮用自 来水（含氟F﹣＜0.5 mg／L），低氟组、高氟组分别饮用加氟5mg/L、50 mg/L的自 来水。实验6个月后股动脉放血处死，采用氟离子选择电极法检测大鼠尿氟、骨 氟含量。取大鼠股骨下段，HE切片观察骨、骺板软骨组织病理学变化，并测定骨 皮质厚度、骺板软骨厚度、增殖层、肥大层软骨细胞层数、骨小梁宽度等骨、骺 板软骨形态学指标。采用免疫组织化学方法测定骨组织和骺板软骨OA蛋白表达水 平，用原位杂交技术测定OA的mRNA表达水平，分析OA在对照组与相应慢性氟中毒 大鼠骨组织及骺板软骨病理形态改变中的表达。 结果 （1）实验组大鼠出现不同程度的氟斑牙，且髙氟组重于低氟组；染 氟组大鼠尿氟、骨氟含量明显高于对照组，各组间比较差异有统计学意义(P＜ 0.05)。(2) 氟中毒组大鼠股骨出现骨皮质增厚，骨小梁宽度增加，骨髓腔间隙 缩小，等骨质硬化表现，与对照组比较，各项检测指标差异有统计学意义(P＜ 0.05)，且随染氟浓度增加，以上病变也加重。（3）高氟组大鼠骺板软骨厚度较 对照组及低氟组增厚明显（P＜0.05)，低氟组大鼠骺板软骨厚度与对照组比较无 统计学意义（P0.05),高氟组大鼠骺板软骨增生层软骨细胞层数较对照组、低氟 组增多明显（P＜0.05)，低氟组大鼠骺板软骨增生层软骨细胞层数较对照组减少 明显（P＜0.05)，高氟组大鼠骺板软骨肥大层软骨细胞层数较对照组减少明显（P ＜0.05),低氟组大鼠骺板软骨肥大层软骨细胞层数与高氟组、对照组比较无统计 学意义（P0.05)（4）与对照组相比，低氟组大鼠骨组织OA蛋白及mRNA表达降低 （P＜0.05)，高氟组骨组织OA蛋白及mRNA表达相当（P0.05)。高氟组与低氟组 相比骨组织OA蛋白及mRNA表达增高（P＜0.05)。（5）与对照组相比，低氟组大 鼠骺板软骨OA蛋白及mRNA表达降低（P＜0.05)，高氟组骺板软骨OA蛋白及mRNA 表达相当（P0.05)。高氟组与低氟组相比骺板软骨OA蛋白及mRNA表达增高（P ＜0.05)。 结论 过量的氟促进染氟大鼠骨质硬化，骨质硬化程度随体内氟蓄积增加 而增加；氟骨症在高氟条件下进行性发展。过量氟促进骺板软骨细胞分化、成熟、 钙化，一定剂量的氟蓄积其毒性作用影响机体软骨内成骨，伴随过量氟增加又可 进一步刺激软骨内成骨。过量的氟影响染氟大鼠成骨细胞、骺板软骨肥大层软骨 细胞表达 OA，提示 OA 参与氟骨症的代谢。 关键词：氟中毒；骨活素；骨；骺板软骨 前 言 地方性氟中毒(endemic fluorosis,简称地氟病)是在特定的地理环境中发生的 一种生物地球化学性疾病，是由于长期生活在高氟环境中而摄入含氟量高的饮 水、食物和空气，导致人体中氟元素蓄积而引起氟斑牙、氟骨症等牙齿和骨骼病 变的现象[1]。地方性氟中毒是地球上分布最广的地方病之一，在全世界五大洲的 40多个国家有不同程度的流行。我国也是该病世界流行中较严重的国家之一，据 2011年统计结果显示[2]，全国有病区县1309个（饮水型1136个，煤烟污染型173 个），病区村人口约为1亿2170.7万（饮水型8851.7万，煤烟污染型3319万）, 患氟斑牙人数为3513.3万（饮水型2033.1万，煤烟污染型1480.2万），氟骨症人 数为328.3万（饮水型133.7万，煤烟污染型194.6万）控制县数220个（饮水型196 个，煤烟污染型24个），累计防治受益人口8324.9万（饮水型5381.7万，煤烟污 染型2943.2万）。贵州省是地氟病较为严重的一个省份，重病区主要分布在毕节 地区和六盘水市，据2005年相关资料统计[3]，病区16岁以上人群氟中毒临床症状 体征阳性检出率为27.03％，其中临床氟骨症检出率为57.47％，重度氟骨症检出 率为7.13％。目前，随着病区改水改灶等措施的实施，地氟病流行程度有所降低， 但限于地理、技术及财力等方面的因素，地氟病流行现状仍然不容乐观。 氟是人体必需的微量元素之一，主要分布在骨骼、牙齿、指甲、和毛发中。 氟对机体的影响随着摄入量而变动。当氟缺乏时，动物和儿童龋齿发病升高，摄 入适量的氟可预防龋齿，有益于儿童生长发育，可预防老年人骨质变脆。摄入过 量