抗牛支原体及巴氏杆菌性肺炎二联卵黄抗体的制备及应用效果研究-兽医专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Study on Preparation of Yoly against Bovine Mycoplasma And Pasteurella Multocida pneumoniae And effect on Clinical Application A Dissertation Submitted to Shihezi University In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Veterinarian By Gao Jia-deng (Veterinary technical services) Dissertation Supervisor:Prof. Yan Gen-qiang June, 2014 石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除 文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。 研时名:筑系 时间 : 101千年 j 月?日 使用授权声明 本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主 管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。 有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编 出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。 导附加吟研究生签名:化缘5; 导附加吟 时间 : (lf 年 J 月 γ 日 时间 :OT f tj. 年 J 月乒日 摘要 由牛支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染引起的犊牛肺炎和关节炎，可导致大量犊牛 的死亡及严重的经济损失。因国内尚无理想的疫苗对其进行有效的预防，抗菌药物易产 生耐药性及效果不稳定。本研究旨在制备抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌的卵黄抗体并进 行临床应用观察，为本病提供新的防治方法。研究结果如下： 1、抗牛支原体高免卵黄抗体的制备：首免采用弗氏完全佐剂灭活苗免疫蛋鸡，剂 量为 0.5mg/只，首免后第 15、30、45d 采用弗氏不完全佐剂灭活苗进行加强免疫，剂量 分别为 1mg/只、1.5mg/只、2mg/只。通过间接 ELISA 的方法检测卵黄抗体效价，结果 表明：在首免后第 15d 卵黄抗体效价不断增高，免疫后第 60d 达到高峰，效价为 1:128000， 并维持 30d 以上效价开始下降。 2、抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体的制备：首免采用弗氏完全佐剂灭活苗免疫 蛋鸡，剂量为 15 亿/只，首免后第 10、20、30d 采用弗氏不完全佐剂灭活苗加强免疫， 剂量为 30 亿/只。采用已建立的 IHA 方法检测卵黄抗体效价，结果表明：在首免后第 3 周出现抗体并且效价不断增高，免疫后第 7 周抗体效价达到高峰，效价为 1:1024，持续 5 周开始下降。 3、抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联 IgY 的制备：通过对水稀释法、氯仿法和卡 拉胶法三种提取 IgY 方法的比较，结果表明：采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗 体 IgY，操作简便、时间短、IgY 得率较高，可作为卵黄抗体 IgY 的首选提取方法；无 菌检测及动物安全性实验表明制备的 IgY 安全可靠。 4、高免二联卵黄抗体的临床应用与观察：通过灌服不同剂量的卵黄抗体及肌肉注 射不同剂量 IgY，对犊牛进行预防和治疗，结果表明：最佳的预防量为灌服二联卵黄抗 体 20mL/头，肌注 IgY3mL/头；最佳的治疗量为灌服二联卵黄抗体 40mL/头，肌注 IgY4mL/头，如果配合使用氟苯尼考和泰乐菌素其治愈率可达 80%以上。 关键词：牛支原体；牛多杀性巴氏杆菌；卵黄抗体；ELISA；间接血凝试验 论文类型：B（应用研究） I Abstract Abstract II万方数据 II 万方数据 The calve pneumonia and arthritis,which caused by the mixed infection of Bovine Mycoplasma and Pasteurella multocida and it can lead to a large number of calves’ death and cause severe economic loss. There is no ideal vaccine to prevent these diseases effectively, and it is easy to develop resistan