ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用分析.docVIP

ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备与应用分析 摘要：目的探讨分析ELISA检测HIV抗体室内质控血清 的制备与临床应用。方法应用ELISA对我血库收集的血液 标本32000份进行HIV抗体检测；同时选择正常人群血清与 试剂盒内HIV阳性血清混合稀释，混合恰当比例，冷藏保存 使用；同时将自制的质控血清保存1?12个月，对其均匀性、 精确性及稳定性进行评价。结果ELISA法检测结果显示阳性 115例，阳性率为0.36%，实际上HIV抗体为阳性共120例， 漏诊率为0. 016%；研究结果显示正常人群的血清与试剂盒内 HIV阳性血清以10: 1的比例进行混合最为恰当；对自制的 质控血清为期1?12个月的观察，发现其均匀性、S/CO值、 准确性12个月的差异不显著(P0.05)，无统计学意义，见 表1。 3讨论 自从1981年在美国发现首例由人类免疫缺陷病毒(HIV) 引起的艾滋病以来，人类一直在与其进行着不懈的斗争。各 类检测方法及检测手段都在不断改进和更新。目前，在HIV 初筛实验中使用的第三代酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂， 不仅包被的抗原高度纯化，且采用重组和多肽相结合的技 术。双抗原夹心法的应用使HIV抗体需两次选择，大大提高 了敏感性，使漏检率明显下降。但该检测方法对检测人员的 操作技术及试验条件要求较高，易出现假阳性等。因此，开 展实验室质量控制是保证实验室分析结果准确性的必要基 础，也是保证实验间有可比性的关键。 随着艾滋病流行形势的日趋严峻，新发现的感染者数量 不断增加，艾滋病检测也显得越来越重要。目前国内检测HIV 抗体的方法主要是酶联免疫法（ELISA）。2004年版的《全国 艾滋病检测技术规范》要求采用ELISA法时必须要包含内部 和外部对照质控血清，其中外部对照质控血清是为了监控检 测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异，通常为弱 阳性对照，以该试剂盒临界值（Cut-off值）的2?3倍为宜。 HIV病毒主要侵入机体的T淋巴细胞［2］，与细胞结合而 存在于血液之中，HIV抗体分布于患者的血液、精液、阴道 分泌物、唾液、尿液之中，然而在血液、精液、阴道分泌物 中浓度最高。近些年，感染HIV病毒的患者逐年上升，影响 患者的身心健康、对生命安全产生威胁［3］，现阶段仍无有 效的治疗方法，主要停留在预防控制阶段，因此及时的诊断 并加以控制十分关键［4］。 临床上对HIV抗体的检测需要通过建立HIV抗体检测质 量系统，有其特殊性，因此做好实验室的质量管理从而确保 检测结果的准确可靠［5］。卫生部门的规章制度明确规定临 床上对HIV抗体的检测需包含外部与内部质控血清两部分， 主要是由于处于临界值上下的弱阳性外部对照质控血清，使 得反应强度改变较易察看；然而为了保证HIV抗体检查结果 的可靠准确，在应用ELISA法检测过程中需要有弱阳性对照 质控血清，但是在临床检测中，医院由于较难获取HIV阳性 抗体标本而需要通过自制质控血清。本文主要对ELISA检测 HIV抗体室内质控血清的制备与应用分析[6]，研究发现显示 正常人群的血清与试剂盒内HIV阳性血清以10: 1的比例作 为自制质控血清的浓度最为合适，且于对自制的质控血清进 行1?12个月的评估，结果显示其均匀性、S/C0值、准确性 12个月无显著变化，表明自制质控血清较为稳定，能够作为 HIV抗体室内质控血清，但是其存在挥发的可能性，因此质 控血清使用次数需〈7次，分装合理。 综上所述，ELISA在HIV抗体的检测中具有较高的准确 度，且检测结果能够在短时间内反映，值得临床推广应用； 同时发现自制质控血清经济方便，且具有稳定性高的优点， 具有较大的应用前景。 参考文献： 韦雪芳.ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备 [J].检验医学与临床，2011，8 (20)： 2527-2528. 罗雯斌.探讨ELISA法检测HIV抗体的影响因素 [J].检验医学与临床，2010，7 (20)： 2252-2253. 乔健健.直接ELISA法与间接ELISA法检测HIV抗 体的对比分析[J].中国实用医药，2012, 7 (21)： 111-112. 刘建军，李永明.ELISA检测HIV抗体的影响因素 及质量控制措施[J].基层医学论坛，2012，16 (17)： 2231-2232. 胡静云，陈善昌.ELISA检测HIV抗体室内质控血 清的制备与应用[J].实验与检验医学，2009, 27 (5)： 553, 568. 赵建明.ELISA法检测HIV抗体的质量控制[J].医 学信息：上旬刊，2010，23 (15)： 2962. 陈慧英，张锦锋，岑小鹏.ELISA检测乙型肝炎 HBsAg室内质控血清的试制和使用[J]-上海医学检验杂志 2000 (04)