课件：肾衰竭机能实验.pptVIP

注意事项 家兔膀胱十分脆弱,分离时应用镊子探查,避免直接用手术刀或剪刀粗暴分离; 输尿管位置较深,分离和插管时需一人协助拨开肠子和拉扯膀胱,此时需注意用力大小,用力过大时膀胱会因尿液排出而迅速缩小(并不影响实验) 如果可以,分离输尿管时避免损伤伴行血管,否则会大出血影响视线; 输尿管近膀胱处结扎后,可略等片刻,待输尿管略充盈后在剪口插管,会容易很多 插管的管子剪口需有一定锐度,但锐度过高易损伤输尿管;插管时,可转动插管,使斜面向下,否则易撕裂输尿管。 a、影响尿生成因素的观察(对照组家兔） 在各项观察之前先记录5 min的尿量作为对照，然后开始观察 1) 生理盐水20ml 2) 20%葡萄糖5ml 3) 0.01%去甲肾上腺素0.3ml 4) 1％速尿1ml/kg 取0.1ml尿样备测尿钠 颈外静脉注射 b、**治疗（实验组家兔） 颈外静脉注射1%速尿溶液1ml/kg，观察给药后5分钟的尿量和30分钟的总尿量，从中取出0.1ml尿样置于干燥试管中备测尿钠用，测定给药后尿钠的含量，与给药前的尿钠（对照组家兔）进行比较 C.酚红排泄率测定 1)耳缘静脉 0.6％酚红溶液 1ml 颈外静脉 20％葡萄糖30ml 观察：从注射酚红起收集尿液，记录30min 2)尿液→500ml量杯+10%NaOH 10ml+蒸馏水 补充至500ml→混匀→ 试管→与标准比色系列比较→ 30min内酚红排泄率 d.形态学观察 （1）处死家兔，取出肾脏并称重，计算肾体比 (2）比较两家兔肾脏外形，纵向剖开肾脏， 观察皮质及髓质条纹、色泽等。 血钠和尿钠的测定 方法：尿液0.1ml+无水乙醇1.9ml→用力振荡放置10min →3000rpm，5min→取上清液。 比浊法测血钠和尿钠 520nm 单位（ml） 空白管 标准管 血清管 尿液 正常 速尿 血或尿上清液 —— —— 0.2 0.2 0.2 钠标准应用液 —— 0.2 —— —— —— 蒸馏水 0.2 —— —— —— —— 焦锑酸钾 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 血钠、尿钠的测定方法与步骤，数据整理及注意事项、分光光度计的使用 注意事项 1．心脏取血时注射器不用抗凝。 2．颈外静脉插管时套管内应充满肝素。 3．膀胱插管时套管内应充满蒸馏水。 4．每次给药后观察尿量计时应从尿液改变后开始。 5．给速尿及酚红后，必须倒掉之前收集的尿液后才 能重新收集尿液，然后从中取尿样。 6．测尿钠时加无水乙醇后用力振荡，并且操作后立即 比色。 7．血清、标准液等试剂用量要准确。 分光光度计正确操作使用方法： 接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟. 将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较高档.) 根据所需波长转动波长选择钮. 将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路. 在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处. 盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录. 比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净. THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 可编辑 可编辑 影响肾泌尿功能的因素及急性肾功能不全 15预防一班 朱帅伟 实验目的 通过神经、体液因素来改变肾血流量、体液晶体渗透压及肾小管对电解质的重吸收，并观察它们对尿生成的影响。 学习氯化高汞复制急性肾功能不全的动物模型，观察急性肾功能不全时血、尿钠，尿蛋白、肾酚红排泄率的变化及肾形态学的改变，并根据实验结果分析和讨论急性肾功能不全的发病机制。 观察速尿对急性肾功能不全动物模型的治疗效果，分析其可能的作用机制。 实验原理： 1、肾脏的功能： （1）泌尿功能 形成尿液，排出机体的代谢产物。 （2）内分泌功能 分泌肾素、PG、EPO、1,25-(OH)2 （3）灭活某些激素 如胃泌素、甲状旁腺素等。 2、影响尿生成的因素 （1）影响肾小球滤过率的因素 （2）肾小管和集合管重吸收及分泌功能 本实验通过建立急性肾功能不全的动物模型，Hg+进入血循环并在肾小管中反应，破坏了肾小管结构与功能，致使肾小管的阻塞和回漏，导致尿量明显减少。 急性肾功能不全模型的复制 给动物注射HgCl2→ Hg2+进入血液循环→经肾小球滤出→与肾小管上皮细胞膜蛋白质的巯基结合→Hg2+经吞噬作用聚集在细胞内→与细胞器质膜结合并引起结构和功能破坏→肾小管上皮细胞功能和