桑树Phytocystatin基因的鉴定及表达模式分析-生物化学与分子生物学专业毕业论文.docxVIP

西南大学 西南大学 二零一五届硕士学位论文 桑树Phytocystatin基因的鉴定及 表达模式分析 学科专业： 生物化学与分子生物学 研究方向： 植物分子生物学 指导教师： 杨光伟研究员 何宁佳教授 研究生： 王裕鹏 中国·重庆 201 5年5月 万方数据 Dissertation Dissertation for Master’S Degree of Southwest University Identification and Expression pattern Analysis of Phytocystatin genes in mulberry plants Major： Biochemistry and Molecular Biology Field：Plant Molecular Biology Supervisor：Prof．Yang Guangwei Prof．He Ningj ia Candidate： Wang Yupeng Chongqing，RR．China May,2015 万方数据 独创性声明本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的 独创性声明 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已 加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋 友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。 学位论文作者： 王移硼告 签字日期：力圹年，月／∥日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的 规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁 盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院(筹)可以 将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密， 学位论文作者签名：多格翻孝 导师签名：槲、，彳钔～ 口保密期限至 年 月止)。 l 签字日期：加圹年，月厂占日 签字日期：力，，年J＼月纱日 万方数据 目录目录 目录 目录 摘要 ．I ABSTRACT ．V 第一章文献综述 1 1．1概述 ．．1 1．2植物防御昆虫的策略 1 1．2．1物理策略防御昆虫 一2 1．2．2诱导因子策略防御昆虫 一2 1．3乳汁在植物防御中的重要性 3 1．3．1植物乳汁成分 一3 1．3．2植物乳汁成分在防御昆虫的功能 ．．3 1-3．3桑树乳汁 一4 1．4蛋白酶抑制剂简介 5 1．4．1蛋白酶抑制剂家族分类 ．．5 1．4．2植物丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPIs)超家族特征 6 1．4．3半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPIs)超家族特征 6 1．4．4植物Phytocystatin家族特征 7 1．4．5植物Phytocystatins功能 ．8 1．4．6蛋白酶抑制剂在转基因植物中的研究进展 一9 1．5植物蛋白酶抑制剂在昆虫防御中的调控机制及作用机理 一10 1．5．1植物在受创伤、咬食后信号转导通路 10 1．5．2植物蛋白酶抑制剂在昆虫防御中的作用机理及昆虫的应答 1l 第二章引言 ．．13 2．1研究目的及意义 ．．13 2．2主要研究内容 一13 2．3研究路线 一14 第三章桑树Phytocystatin基因的克隆及生物信息学分析 15 3．1材料与数据 15 3．1．1材料 一15 3．1．2相关基因序列的获取 15 3．1．3主要使用生物学软件 15 3．1．4使用试剂及相关溶液配制方法 15 3。1．5主要使用仪器 18 万方数据 西南大学硕士学位论文3。2实验方法 西南大学硕士学位论文 3。2实验方法 18 3．2．1桑树Phytocystatin家族相关基因的鉴定 ．18 3-2．2粤桑幼苗的培养 ．18 3．2．3 RNA的提取与检测 ．19 3．2．4 eDNA第一链的合成 19 3。2．5桑树Phytocystatin家族相关基因的克隆 20 3．2．6桑树Phytocystatin家族基因系统发生分析、多序列比对和三级结构 预测 ．22 3．3结果与分析 22 3．3．1桑树Phytocystatin家族基因的特征 ．22 3．3．2桑树Phytocystatin家族基因克隆及信息学分析 ．23 3．3．3桑树Phytocystatin家族相关基因上游转录位点分析 ．28 3．4总结与讨论 29 第四章桑树Phytoeystatin基因表达分析 31 4．1材料与数据 3l 4．1．1材料 3l 4．1．2主要使用试剂及相关溶液配制方法 ．3l 4．1．3主要使用仪器 ．31 4．2实验方法 3l 4．2．1 RNA的提取及质量检测 -3 l