狼疮抗凝物测定方法的优化选择及生物变异度研究-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

同等学力申请硕士学位 同等学力申请硕士学位 学校代码： 10023 学 号：ZS2011037 硕士学位论文 狼疮抗凝物测定方法的优化选择及生物变异度研究 所 院 北京协和医院 姓 名 寿玮龄 指导教师： 崔巍研究员 导师小组： 崔巍课题组 学科专业： 临床检验诊断学 研究方向： 血栓与止血 完成日期： 201 5年5月 万方数据 中文摘要 中文摘要 中国医学科学院 北京协和医学院硕士研究生学位论文．曼．苎 f㈣掣 3 中文摘要 Y2R 1只，S 第一部分狼疮抗凝物测定方法优化选择的探讨 ．8 研究一狼疮抗凝物检测方法性能验证 ．8 材料和方法 10 参考文献 18 研究二不同的狼疮抗凝物检测试验的临床诊断效能研究 21 参考文献 30 第二部分狼疮抗凝物等血栓与止血特殊项目的生物学变异研究 33 前言 35 参考文献 41 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院硕士研究生学位论文中文摘要 中国医学科学院北京协和医学院硕士研究生学位论文 中文摘要 本论文共分为两个部分，对狼疮抗凝物(LA)的实验室检测标准化进行了探讨。 第一部分完成了基于两个途径的狼疮抗凝物检测方法：改良蝰蛇毒磷脂时间试验 (dR、，vT)和硅凝固时间法(SCT)的性能验证，以及根据ISTH 2009，BCSH 2012 和CLSl2014(H60)三个狼疮抗凝物检测指南，建立APTT(APTTActin、APTTActin FSL和APTT-Synthil)，dRVVT和SCT五种不同LA检测试剂及循环抗凝物指数 (ICA)、纠正百分比(％C)、标准化比值(NR)等结果表示方法的参考范围(RI) ／Cut—off值，比较不同RI／Cut．off值的敏感性和特异性并评估其临床应用，以期为临 床提供可靠的检测结果。目前国内外尚无关于dRVVT和SCT性能验证的文献报道。 按照CLSI EP5．A2，EP6．A2，EP9．A2文件及《卫生部临床血液学检测常规项目分 析质量要求WS／T 406．2012文件》标准，对两种狼疮抗凝物检测方法精密度、携带 污染率、样本稳定性、方法学比对及参考范围建立进行全面评估。同时验证了乏血 小板血浆中血小板计数和样本稳定性。50例乏血小板血浆中血小板计数为(O．9) ×109／L，满足指南10×109／L要求。两种抗凝物检测方法在四个时间点检测结果间 P值O．05，差异无统计学意义。两种试剂批内精密度为0．79％一2．35％，小于2．50％。 dRVVT试验批间精密度为2．76％．3．53％，SCT试验批间精密度为6．23％．7．02％。所 有检测方法携带污染率绝对值3．00％。dRVVT和SCT标准化比值计算所得 RI／Cut—off值分别为1．24和1．16。不同仪器同种方法，和相同仪器不同方法之间比 对数据相关良好，相关系数O．900。两种检测方法标准化比值之间差异无统计学意 义，同时两种方法阴阳性判断间差异无统计学意义。dRVVT和SCT两种狼疮抗凝 物检测方法适用于临床样本检测。 三种APTT试剂ICA对LA检测的敏感性均低于55．0％，APTT试剂中，APTT-SS (二氧化硅激活)阳性似然比大于鞣花酸为激活剂的APTT试剂。同样为鞣花酸激 活剂的APTT试剂，Actin FSL高于Actin。dRVVT三种结果表示方法的敏感性分别 为70．3％-93．1％o，SCT三种结果表示方法的敏感性分别为55．4％-79．2％。除外 APTT-Actin和SCT试剂ICA(RI／Cut．off值为第97．5百分位数)，其余试剂的特异 性均大于90．0％。以dRVVT检测结果1．17～1．50为弱阳性判断标准，两种以鞣花酸 为激活剂的APTT试剂敏感性均低于16．0％，dRVVT以第97．5百分位数为RI／Cut—off 值的敏感性最高为71．2％。APTT-SS在各疾病组中均具有较高阳性率，dRVVT标准 化比值及其组合在抗磷脂综合征(APS)中阳性率最高。APTT-SS和1：1混合试验 在凝血因子缺乏(FD)中阳性率分别为92．5％和7．5％。SCT在FD、口服抗凝剂(OAT) 和健康人群(HS)中阳性率为0。传统的筛选试验．1：1混合试验一确证试验和标准化 比值均与血栓形成相关，比值比LOR)值在4．400．5．667之间。dRVVT和SCT标准 化比值与血栓形成OR值大于其他试验流程。l：1混合试验因为稀释效应对弱阳性 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院硕士研究生学位论文LA检测能力不足，但能有效区分APTT延长是否由凝血因子缺乏导致。筛选试验 中国医学科学院北京协和医学院硕士研究生学位论文 LA检测能力不足，但能有效区分APTT延长是否由凝血因子缺乏导致。筛选试验 ．1：1混合试验．确证试验和标准化比