利用组织工程技术修复长骨节段性骨缺损的实验研究-人体解剖与组织胚胎学专业论文.docxVIP

中文摘要利用组织工程技术修复长骨节段性骨缺损的实验研究 中文摘要 利用组织工程技术修复长骨节段性骨缺损的实验研究 摘 要 由于疾病和外伤等原因所造成的组织或器官功能障碍或丧失，是 人类健康面临的重要危害之一，也是人类疾病和死亡的最主要原因。 近十几年来，随着细胞生物学、qi物材料科学、化学及工程学突飞猛 进的发展和各学科间的交叉渗透，组织工程学(tissue engineering)作 为一门新兴边缘学科应运而生，并得到了迅猛发展，其目的是应用这 些学科的原理与方法，研究和开发组织或器官替代物。其基本方法是 制备具有三维空间结构的支架，将支架与活细胞复合，加以各种生长 因子(grouth factors)，形成具有细胞生命特征、适应受体组织器官要求 的复合体，为细胞及生物活性因子提供新陈代谢、生长发育和有效发 挥活性的场所，也是形成新的具有形态和功能的组织、器官的物质基 础。组织工程技术被认为是未来组织、器官缺损修复和再造的最有效 方法之一。 骨组织再造和骨缺损修复一直是骨科医生面临的难题之一，组织 工程学的创立和发展为解决这一难题提供了新的思路和方法。骨组织 工程(bone tissue engineering)是目前组织工程研究的热点问题之一，内 容主要包括：①细胞种植基质材料的研究开发；②种子细胞性质的研 究；⑧与促进骨再生有关的生长因子方面的研究。其中，细胞种植基 质材料的研究是骨组织工程研究的重点内容，也是能否应用于临床的 重要因素之一。本研究采用NaOH消蚀脱细胞技术制备出家兔长骨密 质骨及松质骨骨细胞外基质(简称骨基质)材料作为支架，分别以新 鲜骨髓及胚胎骨组织来源的成骨细胞作为种子细胞，以重组人骨形成 蛋白(recombinant human bone morphogenetic protein，rhBMP2)作为骨 形成的促进因子，对家兔进行了体内异位成骨及桡骨节段性骨缺损修 复的实验研究。 第一部分采用NaOH消蚀技术制备骨组织工程支架材料及其生物相容 性实验研究 目的：研制一种新型的天然骨组织工程载体，观察其结构特征并 中文摘要探讨其在活体内的生物相容性及牛物降解性。 中文摘要 探讨其在活体内的生物相容性及牛物降解性。 方法：取健康家兔桡骨骨十及骼嵴松质骨，经2％戊二醛／4％多聚甲 醛混合液交联后，室温下6％NaOH水溶液消蚀脱细胞7天，蒸馏水超 声震荡清洗，彻底清除细胞碎爿‘及残存药液，直至清洗液清澈透明， pH值7，烘干。对制备好的两种骨基质材料行扫描电镜(scanning electric microscope，SEM)观察、生物力学测定、埋植于动物体内观察其 生物相容性及可降解性，同时还对埋植前后的材料进行了X射线能谱 化学元素分析，通过测定其化学元素的变化，了解其降解吸收的情况。 结果：①骨基质材料的SEM特征骨组织经NaOH消蚀及超声震 荡清洗后，细胞成分被彻底消蚀掉。密质骨骨基质的主要成分胶原纤 维和骨盐仍维持原有形态及结构特征，胶原纤维聚集、排列成规则的 网状支架。骨盐沿胶原纤维排列。松质骨呈疏松的彼此沟通的多孔样 结构，表面略粗糙，可见胶原纤维纹理。②生物力学测试结果密质 骨基质材料的三点抗弯曲强度结果为(0．0808±0．008)N，抗压缩强 度为(0．2453±0．078)N，对照组结果分别为(0．1035---／-0．017)N和 (0．4675±0．07)N，经NaOH消蚀后，力学强度低于正常骨组织@ d0．05，PO．01)。③生物相容性实验结果将埋植于家兔背部肌肉中 的两种支架材料分别于术后1周、2周和4周取出。可见密质骨周围有 纤维结缔组织包裹，少许淋巴细胞浸润和新生毛细血管；松质骨材料 于埋植一周后即有结缔组织长入松质骨基质的孔隙内。随着埋植时间 的延长密质骨支架结构逐渐疏松，松质骨支架逐渐减少，被降解吸收。 ④骨支架x射线能谱化学元素分析结果经NaOH消蚀后，密质骨基质 材料的主要化学元素仍为钙和磷。埋植后钙原子含量(％)为(68．18 ±6．13)，明显低于埋植前水平(91．54±2．29)，两者间有极显著差异 (PO．001)。 结论：经NaOH消蚀后的骨组织具有以下优点：①胶原纤维不受 损伤且保持正常结构，骨盐成分羟基磷灰石未被破坏，使该支架仍具 有一定的生物力学强度，适宜修复较大的节段性骨缺损；(g)NaOH去除 了骨组织中的细胞、脂类及杂蛋白，降低了支架的免疫原性，组织相 容性好；⑧在体内易于降解吸收：④制作工艺简便，可根据缺损形状 而塑形。因而可将其作为种子细胞和生长因子的载体用于骨组织工程。 中文摘要第二部分骨基质支架复合rhBblP。及自体红骨髓修复兔桡骨节段性骨 中文摘要 第二部分骨基质支架复合rhBblP。及自体红骨髓修复兔桡骨节段性骨