冷敏感通道在肺脏受冷空气刺激对炎症影响的研究-内科学专业论文.docxVIP

目 目 录 一、摘要 1 (一)中文摘要 1 (二)英文摘要 4 二、正文 7 第一部分冷敏感通道在肺脏受冷空气刺激对炎症影响的研究 (一)前言(一)日U舌 · 1／一 (二)材料和方法 ．8 1．材料 ．．8 1．1 动物 ．．8 1．2主要实验仪器 ．．8 1．3主要实验试剂 一9 1．4动物实验用气体温度可控吸入装置 1 O 2．方：法 ．10 2．1分组和建立模型 11 2．2标本的采集及处理 1 l 2．3组织病理学观察 12 2．4实时荧光定量PCR 13 2．5统计学方法 16 (三)结果 ．．1 6 1．支气管及肺组织中炎性细胞浸润情况 1 6 2．琼脂糖凝胶电泳监测PCR扩增产物情况 ．1 8 万方数据 3．支气管及肺组织中细胞因子mRNA的表达情况 3．支气管及肺组织中细胞因子mRNA的表达情况 ．．1 8 第二部分26例寒区新发哮喘士兵诱因分析 L一)日U吾 21 (二)对象和方法 ．21 1．研究对象 2 1 2．方法 21 2．1 研究方法 ．21 2．2统计学方法 ．22 (三)结果 22 1．哮喘士兵的一般情况 22 2．哮喘首次发作时出现的症状 22 3．哮喘诱发因素 22 4．哮喘发作与季节 23 5．冬季作训与哮喘 ．．j ．． ．．24 6．哮喘合并疾病 24 (四)讨论 ．．25 (五)结论 28 (六)参考文献 28 三、综述 32 (一)综述 32 (二)参考文献 ．38 四、攻读学位期间发表文章情况 42 五、致谢 43 万方数据 大连医科大学硕士学位论文一、摘要 大连医科大学硕士学位论文 一、摘要 冷敏感通道在肺脏受冷空气刺激对炎症影响的研究 硕士生姓名：崔海洋 指导教师：马壮教授 专业名称：内科学 中文摘要 第一部分 冷敏感通道在肺脏受冷空气刺激对炎症影响的研究 目的：探究短时间内反复冷空气吸入刺激活化TRPAl通道后活体动物肺脏相 关炎性因子的变化，以及反复冷空气吸入刺激对动物肺组织炎症细胞的分布及组 织浸润情况的影响。阐明反复冷空气吸入诱发哮喘的部分机制。 方法：20只雄性Wistar大鼠，随机分为4组，每组5只。其中空白对照组不 做任何处理；冷空气吸入组为大鼠在麻醉后经口气管插管，接动物实验用气体温 度可控吸入装置，吸入冷空气(2±1)℃；暖空气吸入组大鼠予以冷空气吸入组 大鼠以相同处置，但吸入气体为暖空气(36±1)℃；激动剂刺激组为室温(24± 2)℃环境下雾化吸入601mnol／L丙烯醛；每组均处置3次，1h／次，两次之间相隔 12h。处置结束后处死大鼠，取大鼠气管及右肺组织进行HE染色，检查气管及肺 组织病理学变化。同时，提取各组大鼠气管及左上肺组织的总RNA，采用PCR方 法明确肺脏TRPAl的表达情况后，观察反复短时间冷空气吸入刺激对大鼠肺内 TRPAl通道相关炎症细胞炎性因子白介素1 B(IL一1 D)、白介素5(IL一5)、中性 粒细胞趋化因子(CXCL．1／KC)n]RNA表达的影响。 万方数据 大连医科大学硕士学位论文结果：光镜下正常对照大鼠气管及肺组织结构正常，未发现炎性细胞的浸润。 大连医科大学硕士学位论文 结果：光镜下正常对照大鼠气管及肺组织结构正常，未发现炎性细胞的浸润。 受到冷空气刺激及TRPAl的特异性激动剂丙烯醛刺激后的大鼠气管及肺组织在镜 下均可发现，气道粘膜可明显有炎性细胞浸润，小支气管粘膜水肿，管腔变小， 肺泡间隔增厚，肺泡也明显可见炎性细胞浸润。 通过PCR发现TRPAl在大鼠肺组织中有表达，冷空气吸入组大鼠肺组织中的 IL．1 B、IL．5、CXCL．1／KC mRNA的相对表达量均高于空白对照组和暖空气吸入 组(P0．05)。同时在平行实验中，TRPAl通道特异性激动剂丙烯醛雾化吸入组 也出现与冷空气吸入组相似的结果。 结论：当肺部受到短时间的有害低温(低于17。C)刺激后，能通过TRPAl活 化途径使肺内一些炎性因子表达增加，．肺内炎性细胞聚集。提示TRPAl活化是吸 入冷空气诱发气道炎症性疾病的一个病理机制。 关键词：冷空气TRPAl炎性因子肺脏 第二部分 26例寒冷地区新发哮喘士兵诱因分析 目的：进一步了解寒冷地区作训士兵诱发支气管哮喘危险因素，探讨支气管 哮喘发作的防护策略。 方法：选择沈阳军区总医院呼吸与重症医学科进行流行病学调查的15035位 沈阳军区2012入伍士兵中，入伍后2年内新发且明确诊断为支气管哮喘的26名 士兵为调查对象，通过调查问卷的方式，对常见哮喘诱发因素进行调查。 结果：在26例新发哮喘的士兵中，接触冷空气是除呼吸道感染以外最常见的 发作诱因占65．4％。超过80％的新发哮喘士兵都有长期(每年大于3个月)寒冷环 境下在训练经历。发作季节上，有53．8％的患者(14例)首次出现哮喘症状在冬 季；