灵麻固本平喘汤对哮喘大鼠免疫失衡调节作用机理的实验研究-中西医结合临床专业论文.docxVIP

河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则， 承担相应的法律责任。 研究生签名：多、；友 导师签名籼誓领导签名： 6 P年 多月芗．日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究I作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研究生魏、孙翩躲象兰咧 Q分年 岁月夕日 中文摘要灵麻固本平喘汤对哮喘大鼠免疫失衡调节作用机理 中文摘要 灵麻固本平喘汤对哮喘大鼠免疫失衡调节作用机理 的实验研究 摘 要 目的：支气管哮喘(简称哮喘，asthma)是由多种细胞(如 嗜酸性粒细胞、肥大细胞、气道上皮细胞等)和细胞成分参与 的气道慢性炎症疾病。它是机体对抗原性或非抗原性刺激引 起的一种气管一支气管反应性过度增高的疾病。西医治疗哮 喘方面虽然有见效快等方面的优点，但存在药物副作用较 大、易复发等问题，而中医在治疗哮喘方面有其独特的优势， 因此通过应用中西医结合的方法治疗哮喘，同时研发治疗哮 喘的有效方药具有重要的意义。 根据d,JL哮喘通常具有虚实夹杂的病机特点，导师经过 多年的临床研究，依据宣肺化痰、固本平喘的治法，自拟灵 麻固本平喘汤(LM)，同时配合西药共同治疗哮喘，疗效显著。 为探讨本方的药效及作用机理，我们进行了动物实验。本实 验采用致敏法复制大鼠哮喘模型，通过观察灵麻固本平喘汤 对哮喘大鼠血中T淋巴细胞、免疫球蛋白及补体、肿瘤坏死 因子的影响，从免疫角度探讨灵麻固本平喘汤治疗哮喘大鼠 的作用机理，为本方的临床应用提供理论依据。 方法：参照崔龙苹等[1】哮喘大鼠模型的造模方法。将50 只健康雌雄各半的SD大鼠随机分为5组：正常对照组(简称 正常组，normal group)、模型组(model group)、灵麻固本平 喘汤组(简称中药组，LM group)、氨茶碱组(简称西药组， Aminophylline group)、中西药结合组(简称结合组，Drug 中文摘要combination 中文摘要 combination group)，10只／组。模型组、中药组、西药组、 结合组分别于第l天、第5天和第8天分3次腹腔皮下注射 抗原液致敏，正常组用等量的生理盐水进行致敏。实验第14 天开始将造模后大鼠放入自制的不完全封闭的有机玻璃箱 内，予1％卵蛋白(0VA)溶液用超声雾化器喷雾激发。正常组 用等量的生理盐水进行激发。实验第17天开始，每次雾化 吸入激发前半小时给予药物干预，中药组和西药组分别给予 灵麻固本平喘汤的混悬液和氨茶碱悬浊液灌胃治疗，结合组 给予灵麻和氨茶碱混悬液灌胃治疗，正常组每日给予生理盐 水灌胃。实验第25天，在末次激发结束后12小时内，各组 大鼠断头取血。分别用流式细胞术检测大鼠外周血中T细胞 亚群CD4+、CD8+百分率、CD4+／CD8+比值的变化，用免疫 比浊法检测大鼠血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)和补体(C3、 C4)，用双抗体夹心ELISA法检测血清肿瘤坏死因子 (TNF．Q、)。并取左肺组织固定后切片，常规HE染色制作病理 切片，在光镜下观察各组大鼠肺组织的形态学变化。 结果： 1 LM对哮喘大鼠肺组织病理形态学的影响 正常组：支气管、肺泡组织结构正常。 模型组：细、小支气管的管壁和伴行动脉周围有较多嗜 酸细胞和淋巴细胞浸润，支气管粘膜皱壁增多延长，杯状细 胞增生明显。 中药组及西药组：轻到中度炎性细胞浸润，仍以嗜酸性 粒细胞和淋巴细胞浸润为主；支气管粘膜上皮有轻到中度损 伤，杯状细胞增生不明显。 结合组：炎症明显好转，支气管管腔内及血管周围可见 中文摘要轻度炎性细胞浸润，偶见少许嗜酸性粒细胞浸润；支气管粘 中文摘要 轻度炎性细胞浸润，偶见少许嗜酸性粒细胞浸润；支气管粘 膜上皮基本完整。 2 LM对哮喘大鼠外周血T细胞亚群的影响 与正常组比较：模型组CD4+均明显上升(PO．01)，CD8+ 均明显下降(PO．01)，CD4+／CD8+比值显著性上升(P0．01)。 与模型组比较：各治疗组CD4+均明显下降(氏O．01或氏 0．05)，CD8+均明显上升(尸0．0 1或P0．05)，CD4+／CD8+比值 明显下降，有显著性差异(PO．01或P0．05)。其中结合组 CD4+较中