山羊精液液态保存过程中生理指标及受胎率的变化-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

2．2实验动物 2．2实验动物 16 2．3精液的采集与稀释 16 2．4精液的运输与储存 17 2．5精液质量检测 l 7 2．5．1精子活力和存活率的检测 ．17 2．5．2精子质膜完整率的检测 ．17 2．5．3精子顶体完整率的检测 ．18 2．5．4精子线粒体功能的检测 ．18 2．5．5精子DNA完整性的检测 ．．18 2．6人工授精 ．19 2．6．1母羊发情鉴定 ．19 2．6．2输精 ．1 9 2．6．3妊娠诊断 ．1 9 2．7实验设计与操作 19 2．7．1稀释液 ．19 2．7．2精液质量检测 ．20 2．7．3输精实验 ．．20 2．8统计与分析 20 3结果与分析 。21 3．1保存不同时间内精子活力与存活率的变化 21 3．2精子质膜完整率的变化 22 3．3精子顶体完整性的变化 23 3．4精子线粒体功能完整性随时间的变化 25 3．5精子DNA完整性随保存时间的变化 ．26 3．6人工授精实验 ．27 4讨论 28 4．1精液液态保存过程中精子活力和存活率的影响因素 28 4．2精液液态保存过程中影响精子质膜完整率的因素 28 4．3精液液态保存过程中影响精子顶体完整性的因素 29 4．4精液液态保存过程中影响精子线粒体功能的因素 29 万方数据 4．5精液液态保存过程中影响精子DNA完整性的因素 4．5精液液态保存过程中影响精子DNA完整性的因素 ．30 4．6影响人工授精的因素 30 4．6．1 pH对精子质量的影响 30 4．6．2氧化应激对精子造成的损伤 ．3 1 4．6．3人工授精过程中产生的影响 ．3 1 5结论 。32 参考文献 。33 j}【谢 ．． ． 40 万方数据 山东农业大学硕士学位论文中文摘要 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 对精液保存后进行人工授精是目前加速优良种畜繁育的有效手段之一，精液的有效 保存在畜牧业生产中占有重要地位。精液体外保存主要有冷冻保存和液态保存两种方 法。精液冷冻保存是精液长期保存的有效方法，但是对山羊精液进行冷冻保存后进行人 工授精或者体外授精的所获得的受胎率并不理想，从而限制了冷冻保存在山羊精液保存 上的应用。而山羊精液液态保存与冷冻保存相比具有设备简单，操作简便等优点，并能 达到较长保存时间。如何提高精液保存质量甚至进一步延长山羊精液液态保存时间成为 推广山羊人工授精的关键。 本实验以5只健康的鲁北白山羊为实验动物，采用假阴道法采精。在保存的不同时 间分别检测了精子质膜完整性、顶体完整性、线粒体功能完整性和DNA完整性等几个 方面来对精液保存的质量进行鉴定。同时分别用保存了12天和16天的精液进行人工授 精，并对受胎率进行记录。 结果表明： 1．在体外保存过程中，精子活力和存活率都会随着时间延长逐渐下降，活力在第 6天时为73．9％，与鲜精相比已经出现显著差异，在第15天时，活力为45．3％。 存活率在第15天出现显著差异，在第15天时，存活率为98．1％。 2．精子质膜完整性随着保存时间延长逐渐降低，在第12天时质膜完整率为71．8％， 显著低于新鲜精液，在第15天时质膜完整率降低至65％。 3．在体外保存过程中，精子顶体完整性在保存的第6天时为90．1％，显著低于新 鲜精液。随着保存时间延长，顶体完整率逐渐下降。第15天时顶体完整率为 83．6％。 4．精子线粒体功能完整性与新鲜精液相比，在第12天时为84．3％，显著低于新鲜 精液，并呈逐渐降低的趋势。在保存的第15天时，有线粒体功能完整性的精子 比例为81％。 5．精子DNA完整率在第9天时为85．3％，与鲜精相比出现显著差异。而且随保存 时间延长，DNA完整率持续降低。在保存的第15天时，精子DNA完整率为 42．7％。 6．用保存12天的精液进行输精，冬季输精获得了30％的受胎率，同期对照受胎 万方数据 山羊精液长期液态保存过程中生理指标及受胎率的变化率为33．3％。春季输精获得了78．6％的受胎率，同期对照受胎率为83．3％。 山羊精液长期液态保存过程中生理指标及受胎率的变化 率为33．3％。春季输精获得了78．6％的受胎率，同期对照受胎率为83．3％。 7．用保存16天的精液进行输精，获得了20％的受胎率，同期对照受胎率为71．4％。 以上实验结果说明，在山羊精液的体外液态保存过程中，精子的各项生理指标随着 保存时间的延长都在逐渐下降。精子活力和DNA完整性在保存15天之后下降的比例比 较大。保存到12天时，精子顶体完整性、质膜完整率、线粒体功能完整性和DNA完整 性虽然在保存后与鲜精相比差异显著，但是用保存了12天的精液进行人工授精实验， 在春季输精获得了78．6％的受胎率，效果较好。用保存了16天的精液进行人工授精实 验，受胎率为20％，受胎率较低。 关键词：山羊精