磷酸化肽受体及以磷酸化肽为配体的金属离子感应器的设计-高分子化学与物理专业论文.docxVIP

南开大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取 南开大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取 得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含任 何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的 研究工作做出贡献的其他个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本学位论文 原创性声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者签名： 奎佳光 2011年5月30日 非公开学位论文标注说明 (本页表中填写内容须打印) 根据南开大学有关规定，非公开学位论文须经指导教师同意、作者本人申请 和相关部门批准方能标注。未经批准的均为公开学位论文，公开学位论文本说明 为空白。 论文题目 申请密级 口限制(≤2年) 口秘密(≤10年) 口机密(≤20年) 保密期限 20 年 月 日至20 年 月 日 审批表编号 批准日期 20 年 月 日 南开大学学位评定委员会办公室盖章(有效) 注：限制★2年(可少于2年)；秘密★10年(可少于10年)；机密,k20年(可少于20年) 中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰。蛋白 质磷酸化和去磷酸化对许多生物的细胞功能起开关调控作用，是一种普遍的重要 调节机制。因此，针对特定磷酸化蛋白质设计受体可以调控蛋白质的磷酸化一去 磷酸化过程，进而调控特定的生理活动。 本文设计并合成了几种基于弱相互作用的受体，并通过等温量热法研究了受 体与几种磷酸化肽之间的相互作用。实验结果表明，受体ZnDPAG因其不仅具 有能够与磷酸根产生金属配位作用的zn2+_DPA结构，同时还具有能够与羧酸根 产生静电及氢键作用的胍羰基结构，在水中对磷酸化肽有较强的结合能力，对双 磷酸化肽有非常强的结合能力，结合常数可以达到106 morl，显著高于对比受体 PG．HCl，ZrDPA，ZIlDPAP。 另一方面，在纳米金表面修饰了序列为(CGGCmpSG)的磷酸化肽，并考 察了其对于金属离子(cu2+，Zn2+，Ni2+，Fe3+，ca2+，c02+，Pb2+，Mf+，Ti4+， Z，)的响应行为。在中性缓冲溶液HEPES体系中，磷酸化肽修饰的纳米金具 有较好的稳定性，低浓度的金属离子Fe3+和Z，(O．2 mlVl)的加入会引起纳米金 可视的聚集现象以及紫外特征吸收峰的变化，而其他金属离子的加入则没有明显 效果。 关键词：磷酸化肽，受体，纳米金，感应器 AbstractProtein Abstract Protein phosphorylation is one of the most c幻mmon biological and important post-translational modifications of a protein．The reversible phosphorylation of protein has been known to be a significant regulatory mechanism in many organisms regulating cells signaling and ultimate function of biological systems．Thus，the design of receptors for the phosphorylated peptides may regulate phosphorylation· dcphospho聊ation process SO as to regulate specific physiological activities．This dissertation studies the association between phosphorylated peptides and the synthetic receptors using the isothermal titration calorimetry(rrc)．The results show that the receptor ZnDPAP can bind phosphorylated peptides in a certain extent in the water． ZnDPAG with the Zn2+．DPA and guanidine carbonyl pyrrole has strong binding ability to single-phosphorylated peptides．ZnDPAG has much stronger binding capa