河北省部分地区奶牛流产病因分析和牛新孢子虫病PCR诊断方法的建立与应用.pdf

河北省部分地区奶牛流产病因分析和牛新孢子虫病PCR珍断方法的建立及应用 1引言 奶牛流产是影响现代奶牛养殖业发展的重要因素，每年都给国家和企业造成重大的经济损 失，对奶牛的繁殖和产奶都产生严重危害。奶牛流产病因可分为传染性流产和非传染性流产。据 统计我省现有130万头奶牛，1999年到2003年每年平均约有2．5％奶牛发生流产，所造成的经济 损失上亿元，其中传染性流产占1／2。为了有效控制和防制我省奶牛传染性流产，本次研究主要 针对的是传染性流产中牛布鲁氏菌病、弓形虫病、牛病毒性腹泻一粘膜病、新孢子虫病的调查。牛 布病引起的流产通常发生在妊娠的6～8月，多产死胎或弱胎。弓形虫病、牛病毒性腹泻．粘膜病 及新孢子虫病引起的流产可发生在奶牛妊娠的各阶段。对牛布鲁氏菌病、弓形虫病及牛病毒性腹 泻一粘膜病的诊断方法比较成熟，而新孢子虫病是新近发现的一种寄生虫病．在我国尚未对其建立 诊断方法。 1．1新孢子虫病研究进展 1984年Bjerkas等在患脑膜炎和肌炎的幼犬体内发现了一种外被包囊的原虫，形态与刚地弓 形虫(Toxoplasma 为其为牛流产的病原m“”。此后。各国科学家相继在不同动物体内检测到该病原的存在。 报道最多的是奶牛新孢子虫病．它广泛发生于世界各地17。91：Ⅳ．caninum与奶牛新孢子虫病现 已成为各国兽医寄生虫学家研究的热点I“”1。科研人员对于新孢子虫的分类地位、流行病学调查、 生活史、危害以及诊断和防治方法等方面进行了广泛的研究p8I。 1．1．1N．caninum分类地位 N．caninum的分类地位多年来一直存有争议Il 21”、141,曾经认为是Zgondii，也有人认为是其 它原虫，如Hammondia heydorni。Bdndley等【151研究发现M z 因而认为M 1．1．2 N．caninum生活史及各阶段虫体形态 经过十几年的研究M 溺Ib农韭太学硕{+学能(毕业)论文 部发育过程需要两个宿主，犬是N,caninum的终末维主州；中间宿主主要为牛、绵羊、山羊、鹿、 犬(包括野犬)、马等多种哺乳动物H8。l，可人工感染小飘、天鼠、猫、孤狸、山狗、猪、内蒙 2”、 27】；有报道野生动物也可作为Mctlrlinllm的中问宿主，如美嗣的白尾鹿【28 沙鼠(gerbil鼠)【26 蠡狐狸l弼l：簸裁疆究茇璇一些鸟粪龟霹箨旁N．caninum斡孛淘宿孳三，麴红嚣鹰、死疆等。在终来 宿主犬肠上皮细胞内进行球虫型靛育，在中间宿主体内进行肠外期发育13”。 刚排出的卵囊没有感染憾．卵囊在外界环境中完成孢子化发育，成为嶷有感染性的孢予化卵囊， 孢子化卵囊内禽宙2个孢子囊，每个孢予囊内含有4个子孢予。被孢子纯卵囊瓣染的饲料和饮水 被家畜食入，进入中闻宿主体内，在，j、肠肉释放的子孢子陡斑液循环进入神经细脆、巨噬细臆、 成纤维细胞、J衄瞥内皮细胞、肌细胞、肾小管内皮细胞和野细胞中寄生、发育成新月形的速殖子。 速蹙予大耷为4湛～5。3#m×1．8～2。311m，寄生子寤主细耱的耱浆内带盎空沲中，反复势黉，形 lam 成虫体集落，外被包膜、内含上百个虫体。包囊呈嘲形或卵嘲形，大小不等，～般为15～35 p ×10～27#m，最大壹径霹这107m；毽囊壁平溪，蓐l～3pm，呈势支粒管靛结构，秃闻隔袋： 包囊壁用过碘酸雷夫氏液染色时颜色变化很大，常遐嗜银染俄。速殖予对宿主细胞有很强的侵入 功娆，与宿主缨腿接触5rain秘可结入细胞浆内，更挟的30s罄可钴入捃主{霾臌浆，迅遮分裂形 成虫体榘落。逮猹子体亵有3层结构的单位膜，22掇膜下微管，1个授环，1个锥体，多个线粒 体和内质网，1个离尔基体，1个泡状核和1个核仁，8～18根电子致瓣的棒状体；微线的数量差 异穰太，多静可选150个。有的檄线和鸯体醣内膜骚壹角。棒状体的横径较搬线的蛊径大2～4 倍。在有些成团的速殖予虫落中，速殖子问的电子致密度不离，不含馓线和棒状