联合应用吡哆胺和替米沙坦对自发性高血压大鼠腹主动脉平滑肌细胞增生和凋亡的影响-老年医学专业论文.docx

PAGE PAGE 10 联合应用吡哆胺和替米沙坦对自发性高血压大鼠 腹主动脉平滑肌细胞增生和凋亡的影响 摘 要 目的:研究联用吡哆胺和替米沙坦对大鼠血压水平及血管平滑肌细胞增生及 凋亡的影响，探讨平滑肌细胞（VSMC）增生和凋亡与腹主动脉血管重塑的关系； 探讨晚期糖基化终末产物（AGEs）及其受体（RAGE）与肾素－血管紧张素系统（RAS） 的关系；探讨 AGEs－RAGE 与 RAS 对血管重塑的影响及联用吡哆胺和替米沙坦的干 预效果。 方法: 选取 22 周龄雄性自发性高血压大鼠（SHR）48 只，作为高血压实验组， 每组 12 只，随机分为 4 组：高血压对照组（HC 组）蒸馏水 2ml/d 灌胃一次；替米 沙坦组（T 组） 替米沙坦 6mg/kg/d 灌胃 1 次；吡哆胺组（P 组）盐酸吡哆胺 200 mg/kg/d 灌胃 1 次；联合治疗组（TP 组）替米沙坦 6mg/kg/d 及盐酸吡哆胺 200 mg/kg/d 灌胃 1 次。同周龄雄性威斯塔京都大鼠（WKY）12 只，为正常对照组(NC 组) 蒸馏水 2ml/d 灌胃一次。每 2 周检测大鼠尾动脉收缩压 1 次。干预 16 周后， 取动脉血，分离血清，竞争性 ELISA 法测定血清 AGEs，放射免疫法测血清 AngII， 化学法测血清 NO、SOD 含量。HE 染色光镜下观察各组腹主动脉血管中膜结构的改 变。 TUNEL 法染色，计算各组腹主动脉切片凋亡指数(AI)。免疫组化检测血管平 滑肌 PCNA，计算增殖指数（PI）。免疫组化检测细胞外信号调节激酶 1、2（ERK1、 ERK2）的蛋白表达水平。实时定量 PCR 检测腹主动脉的 RAGE、AT1 的 mRNA 水平。 结果： 1、大鼠尾动脉收缩压结果： 与 NC 组相比 HC 组收缩压明显升高(P0.01)；与 HC 组相比 T 组、TP 组收缩 压下降(P0.01)，P 组收缩压无明显改变(P0.05 )；T 组与 TP 组之间收缩压差异 无统计学意义(P0.05 )。 2、血清生物学指标检测结果： ①与 NC 组相比 HC 组血清 NO、SOD 浓度较低（P0.01）；与 HC 组相比 T 组、P 组、 TP 组血清 NO、SOD 浓度升高（P0.01）；与 T 组、P 组相比 TP 组血清 NO、SOD 浓 度进一步升高（P0.05）。②与 NC 组相比 HC 组血清 AGEs 较高（P0.01）；与 HC 组相比 T 组、P 组、TP 组血清 AGEs 浓度降低（P0.01）；与 T 组、P 组相比 TP 组 血清 AGEs 浓度进一步降低（P0.05）。③与 NC 组相比 HC 组血清 AngII 浓度较高 （P0.01）；T 组与 HC 组相比血清 AngII 浓度升高（P0.05）；P 组与 HC 组相比血 清 AngII 浓度降低（P0.05）；TP 组与 T 组相比血清 AngII 浓度降低（P0.05）。 3、光镜下腹主动脉中膜观察结果： NC 组血管 VSMC 排列整齐，细胞无明显增生肥大，细胞核大小较均一，血管壁 内膜光整，内弹力板排列规则，细胞外胶原纤维增生不明显， HC 组 VSMC 细胞排 列紊乱，细胞增生肥大，血管壁内膜不光整，弹力板受压、断裂和(或)弯曲，细 胞外胶原纤维增生增多。TP 组、P 组、T 组 VSMC 细胞排列、细胞增生、凋亡、血 管壁内膜完整性，弹力板受压、断裂情况，胶原纤维增生情况较 HC 组改善。 4、TUNEL 法凋亡指数（AI）结果： 与 NC 组相比 HC 组 AI 较低（P0.01）；与 HC 组相比T 组、P 组、TP组 AI 升高 （P0.01）；与 T 组、P 组相比 TP 组 AI 进一步升高（P0.05）。 5、免疫组化 PI、ERK1、ERK2 结果： （1）与 NC 组相比 HC 组 PI（增殖指数）增高（P0.01）；与 HC 组相比 T 组、P 组、 TP 组 PI 降低（P0.01）；与 T 组、P 组相比 TP 组 PI 进一步降低（P0.05）。 （2）与 NC 组相比 HC 组 ERKl 升高（P0.01）；与 HC 组相比 T 组、P 组、TP 组 ERKl 降低（P0.01）；与 T 组、P 组相比 TP 组 ERKl 进一步降低（P0.05％）。 （3）与 NC 组相比 HC 组 ERKl 升高（P0.01）；与 HC 组相比 T 组、P 组、TP 组 ERKl 降低（P0.01）；与 T 组、P 组相比 TP 组 ERKl 进一步降低（P0.05％）。 6 、实时定量 PCR 检测 AT1、RAGE 的 mRNA 结果： （1）与 NC 相比 HC 组 AT1 的 mRNA 相对定量较高（P0.01）；