丽蝇蛹集金小蜂卵巢发育与卵黄发生的时间动态-农业昆虫与害虫防治专业论文.docxVIP

中文摘要昆虫卵黄发生及其内分泌调控一直是昆虫生殖生理的研究核心之一，至今已就10个目 中文摘要 昆虫卵黄发生及其内分泌调控一直是昆虫生殖生理的研究核心之一，至今已就10个目 60余种昆虫不同程度开展地了这方面的研究。但是，就膜翅目昆虫而言研究较少，关于膜 翅目的寄生蜂则更少，且对寄生蜂是否拥有卵黄蛋白存有争议。迄今为止，就外寄生蜂是否 拥有卵黄蛋白尚乏任何研究。为此，本论文就蝇类蛹期外寄生蜂一丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitr／penn／s(膜翅目：金小蜂科)，卵巢发育、卵子发生，卵黄蛋白的分子特性，及卵黄原蛋白 的合成、卵巢对卵黄原蛋白的摄取及卵子内卵黄磷蛋白的降解动态作了研究，结果如下： 丽蝇蛹集金小蜂卵巢83％哇1 4对卵巢管组成，17％由3对卵巢管组成。同一根卵巢管中 的卵子可分为三级，即l级卵(无卵黄)、2级卵(含有部分卵黄)和3级卵(充满卵黄)。 卵巢管从寄生后第10天开始出现(此时，卵巢管是透明的，卵室尚未形成)，l级卵从寄生 后第1 1天开始出现，2级卵从寄生后第12天开始出现，3级卵从羽化后第一天开始出现： 喂20％蜂蜜水对卵巢发育有一定促进作用，能显著延长丽蝇蛹集金小蜂的寿命，不喂食或 仅喂蒸馏水，其寿命仅4天，而喂食20％蜂蜜水，从第】1天开始出现死亡，大部分可存活 15天，另有少部分生存达一个月之久。同一种喂食处理中，卵巢长度的时间动态几乎都无 变化；1级卵子数、2级卵子数和成熟卵子数的变化，是抛物线变化趋势，即先增加，然后 减少：基部卵子短径和长径也是抛物线变化趋势。 PAGE电泳结果表明：丽蝇蛹集金小蜂明显存在2条雌特异性带．卵黄蛋白，分子量分 别为18l KD和136 KD；SDS—PAGE电泳分析：存在3条雌特异性带，其分子量为123 KD、 120 KD和91 KD，由此，可推定卵黄原蛋白(vitellogenin，Vg)和卵黄磷蛋白(vitellln，Vn) 由2个蛋白组成，其中分子量较大的蛋白由2个亚基组成；双向电泳结果显示，在120KD 附近有两个特异性点，其等电点为5．5和5．7；双扩散表明，丽蝇蛹集金小蜂卵黄磷蛋白的 抗血清与雌隐成虫虫体、脂肪体、血淋巴和卵巢匀浆液均有免疫沉淀反应，而与雄蜂血淋巴 无免疫反应。说明了Vg与vn具有免疫同源性，是雌特异性蛋白，且由脂肪体合成。 采用ELISA测定法检测了丽蝇蛹集金小蜂卵黄原蛋白合成与摄取，及卵黄磷蛋白降解 的时间动态。结果表明，该蜂卵黄原蛋白的合成与摄取分别起始于寄生后的第10d和第13 d， 即正处于该蜂的蛹初期和隐成虫期。该蜂卵内的卵黄磷蛋白随其胚胎发育过程而降解，寄生 后第3 d，即胚胎发育结束时则全部降解完毕。此外，尚探讨了卵黄蛋白合成、摄取和降解 过程中．血淋巴、卵巢或卵内可溶性蛋白含量的时间动态变化。 关键词：丽蝇蛹集金小蜂．卵巢发育，卵子发生，卵黄原蛋白，卵黄磷蛋白，可溶性总 蛋白，双向电泳，PAG黾SDS，分光光度计，免疫双扩散 前 前 言 蝇类是粪食性、腐食性昆虫，其中大多数是重要的卫生害虫。它们污染食 物、传播疾病、骚扰人畜、威胁人畜健康。 害虫综合治理可以说是经纬万端，而权衡利弊，则往往见仁见智。化学防 治虽可以收到立竿见影之效，但在歼灭害虫的同时，不可避免的摧残天敌昆虫， 导致害虫的再增猖獗；污染环境，破坏生态平衡，甚至危及人畜健康。随着人们 生活水平的提高，特别是环保意识的加强，现在“三生共礅”，即“生产增长、生 活提高、生态改善”成了人们普遍的共识。对环境安全问题的日益重视，寻求化 学防治之外的卫生害虫防治途径，以尽量减少化学杀虫剂用量、生产无公害、绿 色食品，已成必然趋势。其中，通过生物防治措施来有效控制卫生害虫，已成为 人们努力的目标。如作为用于生防的重要生物类群寄生蜂，在卫生害虫的控制中 已发挥了应有的作用。如1914年，澳大利亚引进丽蝇蛹集金小蜂防治丽蝇(blow ny)；1922年，新西兰从新威尔士引进丽蝇蛹集金小蜂防治牧场的羊蛆(sheep maggot)(夏松云，1997)。从基础性研究而言，限制寄生蜂控制潜能发挥的～个 重要原因是，人们对其的生殖生理规律缺乏系统的研究，认识尚不深入。 昆虫卵黄发生及内分泌调控一直是昆虫生殖生理领域的核心问题，至今已 在多种昆虫中开展了研究(叶恭银等，2000)，但其中所涉及的寄生蜂，仅有日 本瘤姬蜂Pimpla nipponica(Nose etal．，1997)、蝶蛹金小蜂Pteromaluspuparum (孙萌，2000；吕慧平，2002)等少数几种。研究昆虫卵黄发生的规律，可为更 有效地保护、繁殖和利用寄生蜂提供理论依据，从而更好地发挥其在害虫生物防 治中的作用。 鉴于此，作者以丽蝇蛹集金小蜂为研究对象，研究了其卵子发生、卵巢发育、 卵黄的合成