卵巢上皮性癌血浆游离DNA的检测及临床价值-肿瘤学专业论文.docxVIP

卵巢上皮性癌血浆游离DNA的检测段临床价值 卵巢上皮性癌血浆游离DNA的检测段临床价值 中文摘要 卵巢上皮性癌血浆游离DNA的检测及临床价值 (摘 要) 研究背景： 卵巢癌是女性的第五位常见肿瘤，为女性生殖道的第二位恶性 肿瘤，卵巢癌的总体5年生存率始终徘徊于30％左右，欲从根本上提高卵巢癌 的总体5年生存率，如何采取有效措施，提高早期卵巢癌的检测率及诊断率，是 目前妇科肿瘤面临的首要任务。由于对肿瘤手术切除标本的检测存在一定的局限 性，要求人们去探索一种快捷、方便、敏感、特异、无创或微创性的检测手段， 而血循环游离DNA的检测及其生物学指标的研究，将成为未来肿瘤研究的一大热 点，并为临床肿瘤的早期诊断、预后监测及跟踪随访等提供一系列方便、快捷、 特异、无创或微创的分子生物学检测手段。已经证实，增值旺盛的肿瘤细胞持续 释放DNA进入血液循环，肿瘤患者外周血循环DNA分子具有与原发肿瘤组织相一 致的生物学特性，肿瘤循环DNA的研究在乳腺癌、肺癌、胃肠肿瘤及头颈肿瘤等 方面，已走在了前列，而在卵巢癌方面研究较少。事实上，卵巢癌血循环DNA具 有与卵巢癌组织相同的分子生物学特性，但到目前为止，尚没有关于卵巢癌血浆 游离DNA水平范围的报道，也未见血浆游离DNA与卵巢癌有关病理特征、术前术 后、早期诊断、疗效观察、检测随访等临床应用方面的研究。 目的： 通过对健康对照、卵巢良性肿瘤及卵巢上皮性癌患者血浆中游离 DNA水平的检测，以期建立一种能够对早期卵巢癌进行快捷、敏感、特异的筛查 诊断方法；通过观察卵巢上皮性癌循环DNA不同时期的动态变化，进一步了解血 浆游离DNA在疗效观察、复发预测及预后随访中的作用；同时还进行血浆游离 DNA水平与血清CAl25水平的相关性研究，以期找出血浆游离DNA的变化规律及 与血清CAl25的相关性，迸一步完善卵巢癌的诊断及随访指标。 方法： 收集复旦大学附属肿瘤医院卵巢上皮性癌标本207份，其中术前血 标本93份，术后血标本1 14份，有完整随访资料标本12份。另外收集卵巢良性 肿瘤标本25份，取自肿瘤研究所健康体检人群标本30份。所收集标本离心去血 球后一80 Co冻存：采用DNA抽提试剂盒进行微量DNA抽提和纯化；利用标准含量 DNA制订检测DNA的标准曲线：应用SYBR green I作为荧光显色剂，在紫外与 可见光成像分析系统内，345 rim波长紫外光下激活，以CCD相机摄像后输入电 脑系统，分别读取各不同含量DNA所显色的发光强度，再根据标准曲线所作回归 方程，分别计算出其相应的DNA含量。采用SPSS 11．0统计软件进行统计分析。 卵巢上皮性癌血浆游离DNA的检测及临床价值 卵巢上皮性癌血浆游离DNA的检测及临床价值 中文摘要 结果： ①卵巢上皮性癌血浆游离DNA范围为8～224 ng／ml，均值为 82．1±60．6 ng／ml：卵巢良性肿瘤范围为O～56 ng／ml，均值为21．1±17．6 ng／ml； 健康对照组范围为O～48 ng／ml，均值为14．9±13．4 ng／ml。卵巢上皮性癌血浆 游离DNA水平较卵巢良性肿瘤高4倍左右，差异有显著性(p=O．000)；较健康 对照人群高5倍左右，差异有显著性(p=0．000)。其曲线下面积为0．847，95 ％可信区间为0．82～0．93。若取44 ng／ml作为诊断卵巢癌的临界值，则该诊断 性试验的特异性高达90％以上。②卵巢上皮性癌血浆游离DNA与临床病理类型 及组织学分级无明显相关，而与临床分期显著相关(p=O．016)：IV期患者血 浆DNA水平较其它3期明显升高，差异有显著性(p值分别为0．047、0．02及 0．038)：即使是I期卵巢癌患者。其血浆DNA均值水平也明显高于正常对照及 卵巢良性肿瘤(p值分别为0．000及0．000)。③手术显著影响卵巢癌血浆DNA 含量，术后较术前显著降低，差值有高度统计学意义(p=0．000)。④术后 残留灶大小，直接影响卵巢癌术后血浆DNA变化；术后残留灶1 cm组血浆DNA 下降幅度明显大于术后残留灶1 cnl组，差异有显著性(p=O．000)。⑤卵 巢癌术前血浆游离DNA水平与其相应CAl25间呈同一变化趋势，具有正相关，相 关系数为0．815：而术后血浆DNA与其相应CAl25间无明显相关性。⑥在10例 术后无复发随访病例中，血浆DNA动态变化与随访时间有关(p=O．000)，随着 时间的延长，血浆DNA呈下降趋势；而2例死亡病例，术后血浆DNA持续维持较 高水平。 结论： 卵巢癌血浆游离DNA的检测