酶促反应的动力学.pptVIP

2．反竞争性抑制： 抑制剂不能与游离酶结合，但可与ES复合物结合并阻止产物生成，使酶的催化活性降低，称酶的反竞争性抑制。 反竞争性抑制的速度方程 与图形特征 ⑴ 反竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似； ⑵ 抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合； ⑶ 必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；抑制程度随底物浓度的增加而增加； ⑷ 动力学参数：Km减小，Vm降低。 反竞争性抑制的特点： 3．非竞争性抑制： 抑制剂既可以与游离酶结合，也可以与ES复合物结合，使酶的催化活性降低，称为非竞争性抑制。 非竞争性抑制的速度方程 与图形特征 无 I [S] v V/2 km 有 I (′) ⑴ 非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似； ⑵ 底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合； ⑶ 抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响； ⑷ 动力学参数：Km值不变，Vm值降低。 非竞争性抑制的特点： Km Vm 竞争性的抑制剂 km(1+[I ]/ki) ↑ 不变 非竞争性抑制剂 不变 Vm 1+[I]/ki ↓ 反竞争性抑制剂 Km 1+[I]/ki ↓ Vm 1+[I]/ki ↓ 六、激活剂对反应速度的影响 能够促使酶促反应速度加快的物质称为酶的激活剂。 酶的激活剂大多数是无机离子，如K+、Mg2+、Mn2+、Cl-等。 第二节 酶促反应动力学 酶反应动力学主要研究酶催化的反应速度以及影响反应速度的各种因素。 在探讨各种因素对酶促反应速度的影响时，通常测定其初始速度来代表酶促反应速度，即底物转化量5%时的反应速度。 反应速率：单位时间内反应物或生成物浓度的变化。 一、底物浓度对反应速度的影响 （一）底物对酶促反应的饱和现象： 反应级数： （1）当[S]很低时，υ与[S]成正比，表现一级反应。 （2）随[S]的增加，υ也随[S]的增加而增加，但不成正比。 （3）当[S]很大时，υ达到最大值Vm，[S]增加υ不再增加，表现零级反应 （二）米氏方程式的推导： Michaelis Menten 于1913年推导出了上述矩形双曲线的数学表达式，即著名的米氏方程。 Vmax　?［Ｓ］ 　　ｖ＝ 　　　　　 Ｋｍ＋［Ｓ］ “中间产物”假说(--米氏学说)--酶与底物先络合成一个络合物（过渡态物质 ），络合物再分解，成为产物+游离态酶 米氏方程 ：底物浓度与酶促反应速度的关系 E + S ES E + P k1 k2 k3 v = Vmax[S] Km +[S] 米氏方程式的推导 假设：酶与产物（E+P）的逆向反应形成ES复合物的速率不明显。K1, K2, K3为反应的速率常数 E + S ES E + P k1 k2 k3 ES的生成速率：v1 = K1([E0]- [ES])[S] ES的分解速率：v2 = K2[ES]+ K3[ES] 当反应达到平衡时：v1 = v2 即 K1 ([E0]- [ES])[S] = （ K2 + K3 ）[ES] = ([E0]- [ES])[S] [ES] K2 + K3 K1 令 K2 + K3 K1 Km= 则 ([E0]- [ES])[S] [ES] Km= ① 化简① 式得： 由于酶的反应速度 v = K3[ES] ③ 将② 式代入③式得 ② [ES] = [E0][S] Km+[S] 当底物浓度很高时，[E0] = [ES]，酶促反应达到最大速度　　即 Vmax = K3 [ES] = K3[E0]　　　 　　 ⑤ v = K3 [E0][S] Km+[S] ④ ⑤ 式代入④式得 ： v = Vmax[S] Km +[S] （三）Km的意义： 1. 当ν=Vmax/2时，Km=[S]。因此，Km等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。 2. Km可以反映酶与底物亲和力的大小。Km越小，酶与底物的亲和力越大。 3. Km是酶的特征性常数：在一定条件下，某种酶的Km值是恒定的，因而可以通过测定不同酶的Km值，来判断是否为不同的酶。 4. Km可用来判断酶的最适底物：当酶有几种不同的底物存在时，通过测定酶在不同底物存在时的Km值，Km值最小者，即为该酶的最适底物（或天然底物）。 （四）Km和Vmax的测定： 1