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纤维蛋白原监测及其临床应用的研究进展
颜娅钱科(第三军医大学大坪医院麻醉科重庆400042)
【 】纤维蛋白原是重要的凝血因子,其临床监测方法多样。纤维蛋白原的准 确测定在凝血病、心脑血管疾病、肝病、恶性肿瘤等多种疾病的诊断、治疗方面 起着重要的作用。
【关键词】纤维蛋白原 测定方法 临床应用
【中图分类号1R44【文献标识码】A【文章编号]2095-1752 (2012) 03-0030-02
纤维蛋白原(Fibrinogen, FBG)是临床常用监测项目,在止血过程中具 有重要作用,是临床手术病人不可缺的监测项目。FBG的准确测定对疾病的诊断、 治疗、愈后有着重要意义,木文对纤维蛋白原的监测及临床应用的研究进展进行 综述。
1纤维蛋白原的结构
FBG是一种糖蛋白,分子量为340kd,由肝细胞合成并分泌。其结构为 相同的组分(Aalpha;, Beta;beta;, gamma;)两个组成六聚体,链间以二硫 键相连[l]o Aalpha;、Beta;beta;、gamma;三条多肽链分别由 610 个、461 个 和411个氨基酸残基组成,在肝脏由独立的多核糖体合成其前体蛋白,在粗面 内质网内将信号肽切除、疏水反应及二硫键形成等加工后,折叠、装配成成熟的 二聚体分子,最后经糖基化、部分磷酸化分泌到胞外⑵。
2纤维蛋白原的功能
FBG主要是作为凝血因子1而直接参与凝血过程。在凝血共同途径中, 凝血酶使FBG分解,脱出两条Aalpha;链,两条Bbeta;链,暴露纤维蛋白单 体的聚合部位,通过非共价结合,形成了不稳定的可溶性纤维蛋白单体。在活化 的凝血因子XIII及Ca 2+的作用下,纤维蛋白单体互相交联,生成稳定的可溶性 纤维蛋白,并将血液的有形成分包绕其中,形成牢固的血栓。
3纤维蛋白原的监测方法
FBG定量测定是临床上广泛应用的一项试验,文献中报道过和7正在临 床应用的方法很多,各种方法各有一定的长处和不足。血浆FBG的测定方法主要 分为三大类:物理化学法、免疫法、功能法。
3.1物理化学测定法
物理化学方法是根据蛋白质的理化特性而建立的,这种方法特异性差, 影响因素多。如热浊度法和亚硫酸钠盐析法,血浆中其它蛋白质影响其测定,所 得结果往往偏高。
3.2免疫学测定法
这类方法是将纯FBG作为抗原免疫动物,制成多克隆或单克隆抗体,然后 用其致敏胶乳或以被动或反向血凝、免疫比浊、单向免疫扩散、火箭电泳、放射 免疫及ELISA等技术测定FBGo在FBG降解产物浓度gt; 800mu;g/ ml时航体 不会与其反应,因此免疫法不受FBG降解产物、肝素、EDTA或草酸盐等的干扰, 特别适用于检测FBG蛋白水解状态(如溶栓治疗)的患者。由于血浆中存在大量 无功能的FBG ,用功能法测定时结果明显偏低,而用免疫法或物理化学法测定,结 果多正常。
3.3功能测定法
此法又称为可凝固蛋白法,即将FBG作为可凝固蛋白来测定。根据加 入凝血酶形成纤维蛋白凝块后的检测手段不同,又可分为重量测定法、酚试剂比 色法、紫外光度法、测氮法、浊度法和凝血酶凝固时间法(即Von clauss法)等。
目前国外最常用的是Von clauss法,美国1975年使用率已占94%,为 美国临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的方法,这几年在国内应用也增多。此法 影响因素小,线性范围广,精确性高。Von clauss法是在稀释的血浆中加入足量 的凝血酶,使FBG转变为纤维蛋白,测定凝固时间,凝固时间的长短与血浆中的 FBG含量呈反比。
此外临床上还常用一种经济、简单、快速的方法,采用全自动血凝仪行 PT採der法(PT演算法)测定纤维蛋白的功能。PTder法原理是当凝血酶原吋间 (PT)反应完成吋,全部的FBG转变为纤维蛋白,此吋纤维蛋白产生的浊度与FBG 的含量呈正比,利用浊度的变化测定FBG的含量。PT採der法操作简利不需另 加试剂,直接由PT测定值导出,不需要另行单独测定。
许多文献研究显示FBG含量在正常参考范围吋PT採der法与Vonclauss 法有较好的相关性,但标本脂浊、黄疸、溶血等因素会影响PT採姑法测定,使结 果偏高,并在异常范围时准确度差[3]o当FBG含量lt;1.5g/L或gt;4.5g / L 吋.两者具有显著性差异,相关性较1.5?4.5时差。因此,在用演算法得到FBG 含量后.当FBG含量lt;1.5g/L或者gt;4?5g / L时,建议用Clauss法重新测定 FBG含量.用Clauss法测定的含量作为FBG的含量⑷。
近几年,在国外首先采用了血栓弹性描计仪(Thrombelastograph, TEG) 来监测功能性纤维蛋白原,原理是在血样本中加入血小板抑制剂,通过TEG软件 计算,所测得的MA值(血凝块强度)即为排除血小板作
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