慢性间歇性低氧和高脂饲养对兔胰岛细胞凋亡的影响研究-老年医学专业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 中文摘要 目的观察并评价慢性间歇性低氧(CIH)和高脂饲养对胰岛细胞凋 亡的影响及可能机制，同时分析慢性间歇性低氧与高脂饲养因素之间是 否存在交互作用而影响胰岛细胞凋亡，为研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通 气综合征(OSAHS)与2型糖尿病的病理生理联系提供新的思路。 方法采用前瞻性动物实验，随机对照研究和CIH、高脂饲养二因 素二水平析因设计。24只4月龄新西兰兔随机分为对照组(C组)、慢 性间歇性低氧组(H组)、高脂饲养组(F组)、慢性间歇性低氧并高脂 饲养组(H+F组)，每组6只。H组、H+F组置于间歇低氧舱中每天5小 时，每周期8分钟，舱内最低氧浓度8％；F组、H+F组饲以高脂食物； CIH和高脂饲养干预实验持续8周。分别于O、4、8周时给实验兔称体 重，采血化验总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-CH)、游离脂肪酸 (FFA)。干预8周后，经兔耳缘静脉注射空气处死。迅速解剖取出胰 腺组织，一部分石蜡包埋后切片用TUNEL法检测胰岛细胞凋亡；一部 分立即冻入液氮中保存，用RT-PCR法检测Caspase．3基因的mRNA水 平改变，Western印迹法(Western blot)检测Caspase一3蛋白表达的变化， 并进行半定量分析。组间两两比较采用LSD．t检验，用2x2析因分析评 价CIH、高脂饲养两因素对TUNEL检测的胰岛细胞凋亡率、RT-PCR 检测的Caspase．3基因mRNA表达和Western blot检测的Caspase．3蛋白 表达各指标影响的主效应及交互作用。 硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 结果1、四组动物血脂各指标两两比较：H+F组血FFA水平第8周 为(O．75+o．35)mmol／L,高于0周(O．20±O．14)mmol／L和4周(0．27±0．13) mmol／L，差异有统计学意义。(PO．05)。 2、2x2析因分析显示CIH对TUNEL检测的胰岛细胞凋亡率、 RT-PCR检测的Caspase．3基因mRNA表达和Western blot检测的 Caspase一3蛋白表达各指标无显著影响， P值分别为O．22、O．90、0．27； 高脂饲养对TUNEL检测的胰岛细胞凋亡率、RT-PCR检测的Caspase．3 基因mRNA表达和Western blot检测的Caspase．3蛋白表达各指标均有 影响，P值分别为0．01、O．03、0．03；慢性间歇性低氧与高脂饲养对上 述3个指标不存在交互作用，P值分别为O．84、O．97、O．80。 结论 1、高脂饲养促进胰岛细胞发生凋亡，并可能通过Caspase．3信号通 路促进胰岛细胞凋亡。 2、未发现慢性间歇性低氧及其与高脂饲养的联合作用促进胰岛细 胞凋亡。 关键词阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征，慢性间歇性低氧，高 脂饲养，胰岛，细胞凋亡 II 硕士学位论文 硕士学位论文 英文摘要 Abstract obj ective：To investigate the effects of chronic intermittent hypoxia (CIH)and high-fat—feeding on the apoptosis of islet cells and related mechanism，and analyse the synergistic effect between CIH and high-fat—feeding．To present a new view for the pathophysiologic relationship of OSAHS and T2DM． Methods：Using prospective animal experiment，randomized controlled study and factorial experiment，24 New—Zealand white rabbits(4 months old) were divided into the following 4 groups：control group(C)，chronic in