前言血液凝固的机制与抗凝血剂作用原理-水产试验所.PDFVIP

  何書廷、黃美瑩、林金榮 水產試驗所水產養殖組 前言 免疫激活物的主要免疫分析指標包括白 血球吞噬作用 (phagocytic activity) 、超氧歧 石斑魚 (grouper) 具有肉質佳、味道鮮 化酶 (superoxide dismutase, SOD) 及呼吸爆 美、成長快速、飼料效率佳及經濟價值高等 裂活性 (respiratory burst activity, RBA) 等 特性，為世界重要的養殖魚種之一 (Ai et al., 2011; He et al., 2003; Siwicki et al., (Heemstra and Randall, 1993) 。由於石斑魚在 1994) 。上述分析項目大多需將魚隻血液中的 較高密度環境下仍能生存且快速成長，因 白血球單獨分離出來，但一般研究報告有關 此，石斑魚集約式養殖在台灣已相當普遍。 白血球分離技術則較少詳細說明，而且血液 然而集約式養殖若管理不善，容易導致養殖 的操作不當，容易引起溶血或凝血，影響後 環境急劇惡化，甚而爆發嚴重疫病，造成重 續分析。本試驗以點帶石斑為試驗魚種，測 大經濟損失 (Chua et al., 1994; Fukuda et al., 試兩種常用的抗凝血劑 (heparin 與 EDTA) 1999) 。當水產養殖生物發生疾病感染時，養 之抗凝血效果，並參考Cheng et al. (2009) 之 殖業者常使用抗生素或化學藥劑加以治療， 密度梯度法 (percoll) ，測試不同濃度percoll 但抗生素使用過量，易因殘留而危害人體健 分離白血球之效果，以期順利取得白血球進 康，而化學藥劑則會對環境造成污染，因此 行後續免疫相關分析試驗。 許多國家在動物生產上均制定嚴苛的抗生素 及化學藥劑使用規範，必須尋求其他方式以 血液凝固的機制與抗凝血劑作用 維持養殖生物之健康。 原理 魚類對於感染原的入侵會啟動非特異性 及特異性的免疫機制，尤其以非特異性的免 血液凝固需要鈣離子的參與，待多種凝 疫較為重要。目前有相當多的研究報告顯 血因子活化後，反應產生凝血酶原活化物 示，適當的使用免疫激活物 (immunostimulants) (prothrombin activator) ，促使凝血酶原轉變成 可以增加非特異性及特異性的免疫反應，提 凝血酶 (thrombin) ，再由凝血酶分解纖維蛋 高魚隻的抗病能力，對於提升水產生物的養 白原 (fibrinogen) 產生纖維蛋白胜肽 殖成效及預防疾病具有良好的效果 (Geng et (fibrinopeptides) 並活化凝血因子ⅩⅩ，造成 al., 2011; Gupta et al., 2008; He et al., 2003) 。 纖維蛋白的沉積和交叉結合而形成凝血   (王，1991) ，若加入抗凝血劑阻斷其中一個 將比重不同的細胞分層分離。此外，percoll 環節，血液就無法順利凝固。 不穿透生物膜，對細胞無毒性與刺激性，因 低劑量的 heparin 可抑制凝血因子活 此廣泛用於分離細胞、細菌、病毒及細胞內 化