课件：细胞因子和细胞因子受体.ppt

C57BL/6小鼠腹腔注射E.coli 055:B5 LPS 30mg/kg（WT 16只，CTRP4-TG 11只） 数据代表两次独立实验 CTRP4转基因鼠抵抗LPS诱导的内毒性休克 生存曲线 32 野生型小鼠在14h开始死亡，转基因小鼠在27h才开始死亡，开始死亡时间延迟 13h；野生型死亡率为87.5% ，转基因鼠，死亡率72.7%。 CTRP4转基因鼠抵抗LPS诱导的内毒性休克 C57BL/6小鼠腹腔注射E.coli 055:B5 LPS 30mg/kg （WT 5只，CTRP4-TG 5只） 33 CTRP4在DSS诱导的急性结肠炎中作用 WT CTRP4-TG CTRP4转基因对DSS诱导的结肠炎具有明显的保护作用:（a） CTRP4转基因鼠体重减少程度明显，（b）CTRP4转基因小鼠的结肠水肿程度轻，结肠缩短程度轻,(c)CTRP4转基因小鼠的腹泻情况减轻,(d) CTRP4转基因小鼠结肠出血情况减轻,(e)急性结膜炎模型中结肠组织的病理学评分 a b c d e CTRP4转基因对DSS诱导的结肠炎具有明显的保护作用 CTRP4转基因鼠在DSS引起的急性肠炎模型中死亡率明显降低 急性结肠炎组织匀浆液ELISA检测，CTRP4转基因鼠IL-6和TNF-α含量明显降低,但IL-17A 差别不明显。 Pg/ug total protein Pg/ug total protein IL-17A in colon tissue Pg/ug total protein DSS诱导的急性结肠炎模型肠组织中细胞因子的变化 CTRP4促进吞噬细胞吞噬凋亡细胞 * CTRP4能够识别凋亡细胞 CTRP4识别凋亡细胞 Live-BSA apoptotic-CTRP4 apoptotic-BSA Live-CTRP4 FITC-CTRP4 (5μg/ml) incubated with macrophage on ice for 1h. CTRP4可识别小鼠腹腔巨噬细胞 Cell counts FITC-CTRP4 CTRP4 识别PMA刺激分化后的THP1 THP-1?cells?were?differentiated?into?macrophages?by?treatment?with?PMA? (10ng/ml)?for?2?days. ?Differentiated?THP-1?macrophages?were?incubated?with?FITC-CTRP4?(5μg/ml) for?60?minutes on ice in dark. Cell counts FITC-CTRP4 CTRP4促进体内凋亡细胞的清除 CTRP4 不识别凋亡细胞表面的PS PBS.001 FL1-H PBS.001 FL1-H PBS.001 FL1-H FITC-Annexin V Cell counts CTRP4 是否识别凋亡细胞上的DNA? Agarose gel electrophoresis showing migration of a linear DNA plasmid (200 ng) in the absence of protein (-) or in the presence of C1q (20μg/ml), or CTRP4 (20μg/ml). M （ -） C1q CTRP4 4℃, 60min CTRP4 是否识别凋亡细胞上的DNA? Flow Cytometry analysis of the e?ect of DNase treatment on apoptotic cell capture by CTRP4. Cell counts FITC-CTRP4 思考题： 1、试述细胞因子在临床的应用前景 2、试述细胞因子在免疫应答中的作用 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 巨噬细胞----抑制细胞毒性， 促进IL-1的分泌 * Ⅰ型：一次跨膜，N端在胞外，C端在胞内. II 型：一次跨膜，C端在胞外，N端在胞内 一个新的细胞因子CTRP4的发现与研究 立题背景 人类基因组计划 大量功能未知的新基因被陆续克隆并得到鉴定； 功能基因组学； 以新基因功能探索作为疾病研究和治疗切入点； 反向生物学策略； 新基因高通量平台筛选； 新细胞因子的筛选和鉴定； 筛选潜在的细胞因子的策