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四棱豆生理生化特性初步探究 ［摘要］:叶绿素含量的高低是反映植物光合作用强弱的 一个重要指标，也是影响植物有机物合成的重要因素。可溶 性糖、丙二醛和可溶性蛋白的含量是了解植物抗逆性的一个 重要指标。通过研究两种四棱豆的不同的部位的生理生化指 标，结果表明：攀援四棱豆叶片叶绿素含量最高，且攀援四 棱豆的叶片、茎尖和果实的叶绿素含量均高于矮生四棱豆。 攀援四棱豆叶中的可溶性糖和MDA含量均最高，且高于矮生 四棱豆。攀援四棱豆叶片受环境胁迫的影响可能较大，而攀 援四棱豆茎尖和果实受环境胁迫的影响可能较小。攀援四棱 豆的可溶性蛋白含量高于矮生四棱豆的含量。攀援四棱豆叶 片中可溶性蛋白含量最高，而矮生四棱豆茎尖和果的可溶性 蛋白含量相近。 ［关键词］:叶绿素；可溶性糖；MDA；可溶性蛋白；四 棱豆 引言 四棱豆(Psophocarpus tetragonolobus De.) 是豆科 四棱豆属一年生或多年生缠绕草本植物，别名翼豆、四角豆 等。四棱豆的嫩荚、块根、种子、嫩梢和叶均可食用，营养 极其丰富，故又被称为“绿色黄金”、“奇迹植物” ［1］。 四棱豆的嫩荚、嫩叶和花的蛋白质含量十分丰富。其营养价 值、经济价值和药用价值已引起世界性的重视和研究，成为 许多国家争相开发利用的植物资[2-3] o现在，在美国、印 度、印度尼西亚、斯里南卡、非律宾、加纳等许多国家，以 及在我国海南、广西、广东、湖南、湖北等地区均已广泛 种植和开展研究。但由于各种原因，四棱豆的推广和研究 进展比较缓慢[4-6] o 叶绿素含量是反映植物特别是光合机构生理状况的一 个基本指标，植物生理研究中经常涉及叶绿素含量的测定 [8-9] o丙二醛含量的多少可以代表膜损伤程度的大小[10]。 因此，测定其丙二醛含量的变化，旨在为四棱豆的抗逆性测 定奠定基础，为四棱豆的育种和资源开发利用提供科学依 据。 基于前人对四棱豆已经做出了一些研究，但缺乏对不同 种类四棱豆不同生长部位的生理生化特征的研究。本文以两 种不同品种的四棱豆相比较，通过测定不同部位几种生理生 化指标的变化，为四棱豆的综合利用提供实验依据。 2?材料与方法 1不同种类实验 2010年3月播种； 不同种类的支持物设计：198四棱豆在四肢架旁播种， 矮生四棱豆匍匐处理。 2. 2样品采集 攀援四棱豆和矮生四棱豆于肇庆良种场生长3个月后， 采集新鲜的四棱豆功能叶、茎尖、果实用于测定叶绿素、丙 二醛、可溶性糖、可溶性蛋白。 试剂:80% 丙酮、纯丙酮、10%TCA. 0?6%TBA、KH2P04 (20mmol/L). G-250 染色液 3测定方法 2. 3. 1鲜叶中叶绿素的含量测定[9] 取新鲜样品0. 25g放入研钵中，加纯丙酮研磨2. 5mE 碳酸钙和石英砂研磨成匀浆，再加80%丙酮2.5ml,将匀浆 转入离心管,适量的80%丙酮洗涤研钵,离心4000R, lOmin, 取上清液用80%丙酮定容到10ml；取上清液lml,加80% 丙酮4ml稀释后转入比色杯进行光密度的测定663nm和 645nm的0D值；对照组用80%丙酮。计算色素提取液中叶 绿素a、叶绿素b及叶绿素a+b的浓度。 2. 3.2鲜叶中可溶性糖和丙二醛(MDA)含量测定[9] 取新鲜样品0. 5g放入研钵中，加5mll0%的三氯乙酸 (TCA)和少量石英砂进行研磨提取，转入离心管，离心 4000R, lOmin,提取上清液2ml,加入0. 6%TBA液，混匀加 塞，于沸水浴沸煮15min,迅速冷却，离心，取上清液进行 显色反应并测定450nm、532nm和600nm的0D值，最后计算 MDA含量。 2. 3. 3鲜叶中可溶性蛋白含量测定[10] 取新鲜样品0. 5g放入研钵中，加KH2P04 （20mmol/L） 2ml和少量石英砂，研磨，用KH2P04定容10ml,,放置在30° 水浴（0.5?lh）再离心4000R, 20min取离心后的上清液， 定容到10ml；取样液0. lml加KH2P042ml,加G-250染色液 3ml,测 620nm 的 0D 值。 3?结果与分析 1种类四棱豆不同部位的叶绿素含量的比较 叶绿素含量的高低是反映植物光合作用强弱的一个重 要指标，也是影响植物有机物合成的重要因素。攀援型四棱 豆和矮生型四棱豆不同器官中总叶绿素、叶绿素a、叶绿素 b含量呈现相同的规律，都是叶片含叶绿素最高，而茎尖次 之，而果实含量是最少。（见图1A-C）；两种四棱豆比较，攀 援型四棱豆叶片的总叶绿素、叶绿素a、叶绿素b含量均比 矮生型四棱豆高，而矮生四棱豆茎的总叶绿素、叶绿素a、 叶绿素b含量则均比攀援型四棱豆高，两种四棱豆果的总叶 绿素、叶绿素a、叶绿素b含量则无明显差异；图1-D表明 攀援四棱豆叶片的叶绿素a/b的比值最大，