镇痛实验教学课件.ppt

copyright 2006 All Rights Reserved 镇痛药实验 目的和原理 观察罗通定和阿司匹林的镇痛作用 了解常用的镇痛实验方法 热板法 化学刺激法 鼠尾压痛法 光照甩尾法 * * 一、热板法 【实验目的】 观察罗通定的镇痛作用。 【实验原理】 利用一定的温度刺激动物躯体的某一部位以产生疼痛反应。把小鼠放在事先加热到55℃的金属盘上，以舔后足为“疼痛”反应指标，以产生痛反应所需的时间为痛阈值。 【实验材料】 动物：小鼠(雌性) 药品：罗通定溶液、生理盐水。 器材：YLS-6A智能热板仪。 * * YLS-6A智能热板仪 1. 打印键； 2. 分组键； 3. 计时键（T键）； 4. 升温键； 5. 降温键； 6. 温度显示； 7. 时间显示； 8. 打印指示灯。 实 验 方 法 热板法 仪器:YLS-6B智能热板仪 时间显示/计时键（55度） 观察指标: 鼠舔后足(速度快注意观察) 筛选：将小鼠放在热板仪上，以舔后足为“疼痛”反应指标，记录产生痛反应时间 * * 【实验方法与步骤】 分组与给药：取筛选合格的小鼠2只，称重、编号。 1号鼠腹腔注射生理盐水（0.1ml/10g） 2号鼠腹腔注射0.4% 罗通定（0.1ml/10g） 记录给药后5、15、30和60min时小鼠痛觉反应。 仪器设置：将智能热板仪温设定为55℃ 动物筛选：痛阈值在10～30 秒, 5min后再观察一次，记录平均值 罗 通 定 乙鼠 甲鼠 鼠号 测定时间（min） 药品 30 生理盐水 60 15 5 给药前 (0.1ml/10g) 表1 药物对小鼠热板法痛阈时间的影响 结果和处理 计算药物痛阈提高百分率(%) 痛阈提高百分率％ 〓 用药后痛觉反应时间(均值) 用药前痛觉反应时间(均值) 用药前痛觉反应时间(均值) × 100％ 结果和处理 以时间为横坐标，根据给药后不同时间的痛阈提高百分率作图 根据痛阈提高百分率－时间图，比较镇痛药物的作用起始时间、维持时间 结果和处理 痛阈提高 百分率(%) 50 时间(Min) 5 15 30 60 图：罗通定的痛阈提高百分率－时间图 罗通定  【注 意 事 项】 2个组共用一个热板仪，仪器已设置好(55度) 实验应选择雌性小鼠,因雄性小鼠在遇热时睾丸下降,阴囊触及热板反应过敏,易致跳跃,影响实验准确性。 热板法小鼠个体差异大，应选痛阈值在10－30s之间的实验动物 如60s内不出现痛觉反应，按60s计算， 并取出鼠不再刺激 实 验 原 理 化学刺激法 化学物质(如酸、碱等)腹腔注射可使动物产生疼痛反应，可作为疼痛模型 观察指标: 扭体反应 腹部收缩内凹、 躯干与后肢伸张、 臀部高举 实 验 步 骤 取体重18-22g的健康小白鼠2只，称重，编号 按表灌胃给药，记录给药后小鼠的扭体反应数 给药后30 min 乙鼠 甲鼠 鼠号 药品 6%阿司匹林 生理盐水 腹腔注射2%冰醋酸溶液0.2ml/只，观察10min内产生的扭体反应数 （次） (0.1ml/10g) 表2 药物对小鼠扭体反应数的影响 组别 阿司匹林 生理盐水 扭体反应鼠数 表3 药物对小鼠扭体反应的影响（x ± s n=12） 收集全实验室结果，计算药物镇痛百分率 药物镇痛 百分率％ 〓 实验组无扭体反应动物数 对照组无扭体反应动物数 对照组无扭体反应动物数 × 100％ 结果和处理 (注意：如有实验组小鼠死亡则n﹤12) 实验鼠总数 扭体反应%  注 意 事 项 醋酸溶液宜新鲜配置 全实验室给药组扭体动物数比对照组减少50％以上才能认为有镇痛作用（即药物镇痛百分率大于50%） 室温宜恒定于20度，过高或过低均不易发生扭体反应 化学刺激法和热板法2个实验同时做 灌胃注意不要灌入气管 罗 通 定 (延胡索乙素) 罂粟科植物延胡索等块茎中具有镇痛作用的生物碱 镇静、安定、镇痛和中枢性肌肉松弛作用 阻断脑内DA受体，促进内啡肽释放等 镇痛药 阿司匹林 (乙酰水杨酸) 柳树皮→水杨苷→水杨酸钠→乙酰水杨酸 解热镇痛药 解热、镇痛和抗炎作用 抑制环氧酶，减少PG生成 copyright 2006 All Rights Reserved