人脐静脉内皮细胞磷酸鞘氨醇受体鉴定及其应用探讨-天津医药.PDF

662 TianjinMedJ,June2016,Vol.44No.6 人脐静脉内皮细胞 1-磷酸鞘氨醇受体 鉴定及其应用探讨 1 2 1 2 1 1 1 3 1△ 梁云 ，罗光华 ，刘宏 ，喻妙梅 ，王敏 ，刘洪尧 ，黄波 ，徐宁 ，张晓膺 摘要：目的 鉴定人脐静脉内皮融合细胞株EA.hy926和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）CRL-17301-磷酸鞘氨醇 受体（S1PR）亚型和胞浆中C-myc及His标签蛋白的表达情况，为研究载脂蛋白M（ApoM）-1-磷酸鞘氨醇轴（ApoM- S1P轴）的功能提供参考。方法 体外培养EA.hy926及CRL-1730至细胞密度达到60%～70%时，采用细胞免疫荧 光技术鉴定内皮细胞标志凝血八因子（FⅧ）、ApoM、S1PR1~S1PR5、C-myc和His标签蛋白。结果 （1）两种细胞均 表达FⅧ和ApoM，FⅧ在CRL-1730中呈散在颗粒状分布，在EA.hy926 中呈均匀分布。（2）两种细胞均主要表达 S1PR1，少量表达S1PR2和S1PR3，不表达S1PR4和S1PR5。（3）两种细胞胞浆中均有C-myc和His标签蛋白的表 达。结论 两种细胞都具有内皮细胞的特性；因其自身表达ApoM、C-myc和His标签蛋白，在应用这两种细胞研究 ApoM-S1P轴的功能时，不适合选用带有C-myc和（或）His标签的重组ApoM蛋白。 关键词:内皮细胞；1-磷酸鞘氨醇受体；载脂蛋白M；凝血八因子；原癌基因蛋白质c-myc；His标签蛋白 中图分类号：R331 文献标志码：A DOI：10.11958 Identificationandapplicationofsphingosine-1-phosphatereceptorofhuman umbilicalveinendothelialcells 1 2 1 2 1 1 LIANGYun,LUOGuanghua,LIUHong,YUMiaomei,WANGMin,LIUHongyao, 1 3 1△ HUANGBo,XUNing,ZHANGXiaoying 1DepartmentofCardiothoracicSurgery，2ComprehensiveLaboratory,theThirdAffiliatedHospitalof SoochowUniversity,Changzhou213000,China;3DivisionofClinicalChemistryandPharmacology, DepartmentofLaboratoryMedicine,LundUniversity ΔCorrespondingAuthor E-mail:zhangxy6689996@163.com Abstract: Objective Toidentifytheexpressionofsphingosine-1-phosphatereceptor(S1PR)subtypes,C-mycand Histagproteinsofhumanumbilical