酱油中苯甲酸的气相色谱分析.PPT

酱油中苯甲酸含量的 气相色谱法测定 实验目的 进一步熟悉CP-3800气相色谱仪的使用 掌握用标准曲线法（外标法）进行定量分析的方法 分离原理 气相色谱仪 气路系统 毛细管柱 不锈钢 ?玻璃 ? 熔融硅 柔韧性及机械强度均较好 惰性好 内径：0.05 - 0.80 mm . 长度：20-200 m。 通用型检测器（ Universal Detector) 热导检测器（TCD） 氢火焰检测器（FID） 氢火焰检测器（FID） 最常用的GC 检测器. - 是有机物的通用型检测器。 - 检出限 10 pg. - 线性范围可达7个数量级 . 破坏型检测器－－样品燃烧 信号值大小取决于碳原子数目及替代物的数量。 定量分析方法 基本公式： Mi– I组分的量；Ai–I组分的峰面积；fi– I组分的校正因子 定量分析依据是被测组分的量与响应信号成正比 校正因子： 相同含量的物质由于物理、化学性质的差别，即使在同一检测器上产生的信号也不同，直接用响应信号定量，必然导致较大误差。故引入校正因子。 物理意义：单位面积所代表的被测组分的量。 用已知的标准品配成不同浓度的标准系列，在与被测样品相同的色谱条件下，取固定量标准溶液进样分析，测出响应信号（峰高或峰面积），绘制响应信号与质量分数的标准曲线； 外标法 优点： 操作简单，计算方便，不需要校正因子 不足： 对分析条件及进样量要求十分严格 适用于日常控制分析和大量同类样品分析 苯甲酸 传统防腐剂 动物实验有毒副作用 FAO/WHO规定苯甲酸及其钠盐的每日 允许摄入量ADI: 5-10mg/kg.体重 我国卫生标准规定酱油中最大使用量: 1g/kg 苯甲酸检测方法 薄层色谱法 分光光度法 气相色谱法 液相色谱法 实验内容 1 溶液的配制 2 标准曲线的制作 3 样品处理 4 样品分析 标准溶液的配制 2mg/ml储备液 0.100、0.200、0.300、0.500、1.000mg/ml标准系列工作溶液 样品处理方法二 取2.5ml酱油置于25ml具塞刻度比色管中，盐酸溶液酸化 乙醚各提取，合并乙醚提取液于另一具塞刻度比色管，用NaCl酸性溶液洗涤，静置15min 吸管吸取乙醚层通过无水Na2SO4过滤，乙醚定容 准确吸取5ml上溶液于试管中，40℃水浴去除乙醚，加入2ml氯仿溶解，供分析用。 实验条件 CP-3800气相色谱仪（VARIAN) 色谱柱：CP Sil 24CB 毛细管柱 (VARIAN) （25m*0.53mmID*0.25um） 检测器：FID 载气：氮气 进样量：0.6微升 数据处理 制作标准曲线得到回归方程和相关系数 确定酱油中苯甲酸含量 实验指导 外标法对进样量要求十分严格，进样时注意要赶走气泡。 实验要求 1 严格按照仪器操作规程操作 2 实验完毕清洗色谱柱15min 2 认真做好数据记录与处理 3 准备室和实验室卫生清扫 * * 保留时间– 定性分析 峰面积 – 定量分析 根据样品各组分在流动相和固定相中的分配情况不同来进行分离 分离系统 进样系统 温控系统 检测记录系统 汽化室 进样装置 色谱柱 填充柱 毛细管柱 TCD(1041) FID(1079) 检测器 外标法（External Standard) －－标准曲线法