流式细胞术检测1150例HLA―B27抗原临床价值探析.docxVIP

流式细胞术检测1150例HLA-B27抗原临床价值探析 【摘要】目的为了探讨HLA-B27抗原检测的临床 价值。方法用流式细胞术检测本院及外院送检的1050例患 者及100例健康人群的外周血淋巴细胞HLA-B27抗原，分析 其抗原表达情况与强直性脊柱炎(Ankylosing spondyliti, AS)的关系。结果1150例检测人群中疑诊AS者582例，症 状不典型患者468例，健康体检者100例。在疑诊AS者中 HLA-B27阳性率313/582(53. 7%),临床最后确诊为AS者288 例(占阳性的92.0%),症状不典型者中HLA-B27阳性率 89/468 (19. 0%),临床最后确诊为AS者70例(占阳性的 78. 7%),健康体检者中HLA-B27阳性率4/100 (4. 0%),且4 例均为同一家庭成员，临床无1例确诊为AS。所有HLA-B27 阴性患者中有12例最终为AS者(占阴性的1.6%)。结论 HLA-B27与AS高度相关，对AS的辅助诊断具有重要价值， 灵敏度为96. 8%,特异度为93. 5%,阳性预测值89. 0%,阴性 预测值98. 1%,采用流式细胞仪进行HLA-B27的检测具有简 便、快速、易于标准化及质量控制、结果准确可靠等优点， 有利于临床推广应用。 【关键词】强直性脊柱炎；HLA-B27；流式细胞术 doi： 10.3969/j. issn. 1004-7484 (s) .2013. 08. 696 文 章编号：1004-7484 (2013) -08-4684-03 人类白细胞抗原HLA-B27与人类的免疫系统功能密切相 关，与多种疾病具有相关性，尤其是强直性脊柱炎 (ankylosing spondylitis, AS) [1],是 AS 的重要辅助诊 断依据，为了满足我市AS患者的诊治需求，我院于2008年 开展了流式细胞术检测HLA-B27抗原，现已完成1050例患 者及100例健康体检者的检测，现报告如下。 1资料与方法 1. 1研究对象1050例均来自2008年7月至2013年5 月我院及周边医院送检的住院或门诊患者，男性612例，年 龄14岁-58岁，平均年龄22. 8岁，女性438例，年龄18岁 -62岁，平均年龄25.8岁，其中AS患者582例，症状不典 型患者(如轻度腰背痛、手臂疼痛、关节疼痛、关节僵硬等) 468例，按1984年纽约修订的AS诊断标准，最后明确诊断 AS的有370例。健康体检者100例均来自我院体检中心临床 无腰背、关节疼痛或僵硬等症状者，其中男性68例，女性 32例，年龄19岁-55岁，平均年龄24. 5岁。 1. 2方法 1.2. 1标本按测定要求抽取患者静脉血1ml-2nd于 EDTA-K2抗凝或肝素抗凝管中，立即轻轻颠倒混匀，于24小 时内完成检测。 1. 2. 2试剂与仪器 仪器使用美国Beckman/Coulter EPICS XL型流式细胞仪，试剂使用美国Beckman/Coulter公 司生产的HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE荧光双色试剂、阴性对 照IgG2a-FITC/IgGl-PE试剂及全部原装配套试剂。 1.2.3检测方法检测严格按仪器及试剂说明书进行。 1.2.3. 1 样本处理及检测 将 HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE 单克隆抗体20 ul加入到100 P1全血中混匀，与白细胞膜 上相应的抗体结合，经过溶血(和固定)、洗涤等步骤后， 在流式细胞仪上进行分析测定。 1.2.3.2结果判断HLA-B27阳性且HLA-B7阴性 (HLA-B27+/HLA-B7-)的细胞达 90. 0%以上,同时 HLA-B27 的平均荧光强度(X-Mean)达到8.0以上时判断为阳性结果, 否则判断为阴性。 1.2.4统计方法 结果采用百分比表示，组间结果采用 x 2检验进行相互比较，p 目前，文献报道［4-8］检测 HLA-B27对于早期诊断AS具有重要价值，AS患者HLA-B27 阳性率＞90%, HLA-B27阳性的人群中约有20%-30%的人患有 AS,而HLA-B27阴性者99. 9%不会患AS,如症状和体征提示 AS, B27阳性会显著增加正确诊断的机会，B27阴性则排除 AS诊断的。强直性脊柱炎是一种具有较强的家族遗传倾向， LA-B27阳性的AS患者的HLA-B27阳性亲属的发病率高达 25%-50%,如果对HLA-B27阳性患者的一级亲属进行B27检 测，对AS早期诊断及早期干预治疗均有重要价值。我们的 分析显示：在370确诊AS患者中HLA-B27阳性358例（阳 性率96. 8%）,在406例HLAB27阳性患者中临床最终确诊AS 者 358 例（占 HLA-B27 阳性率 96. 7%）