柱外效应引起色谱柱效损失率的测量.PDF

柱外效应引起色谱柱效损失率的测量 韩富天 吴宁生* （中国科学技术大学应用化学系 合肥 230026） 提要 提出了计算柱外效应对色谱峰方差贡献的方法，由此可计算柱外效应引起的柱效损失率。 关键词 高效液相色谱，柱效能，柱外效应，酮类化合物 柱外效应使色谱峰变宽、不对称度增加、柱效降 式中，a,b和c是系数。各项物理意义如下：b为有效 低和分离度下降。目前，文献所报道的测定柱外效应 检测器死体积（即Veff），a+b/F是柱外效应对τ的 的方法主要有如下几种：（1）用一毛细管代替色谱 贡献，cδ是柱内因素对τ的贡献。 柱；（2）用低死体积接头代替色谱柱；（3）线性外推 据此，色谱柱的真实理论板数nc和有柱外效应 法；（）将板高方程加一柱外效应修正项，然后用拟 时的表观板数n的表达式应为： 合法求得。由于引起色谱峰拖尾的原因除了柱外效 nc=tR2/(1+c2)δ2 (4) 应外，还有柱内因素，如组分在流体间隙空间的轴向 n=t/(δ2+τ2) (5) 弥散和洗脱界面动力学阻力等，因此，上述的方法 将柱外效应引起的柱效损失率Q定义为： （1），（2）和（4）均不能正确测定柱外效应。Claessens Q(%)=(1-n/nc×100 等人（）也指出方法（1）和（2）是不合适的，并且认为 =[(τ2-c2δ2)(δ2+τ2)×100 (6) 方法（3）只有在一系列条件得到满足后才能得到满 这样可在一定色谱条件下用试验物在不同流速下作 意的结果，因而没有普适性。为了计算柱外效应引起 色谱图，求得相应的δ和τ值，再用多元线性回归法 的柱效（理论板数）损失，Cohen和Stuart（）提出了 求得式（3）中的各系数值，即可由式（6）求得Q值。 用参数p表示： 式（3）已被论证是正确的，故由式（6）计算因柱外效 应引起的柱效损失率是合理的。 我们根据文献（4）表Ⅶ髦中的数据和文献（3）表1 中相应的系数值求得不同流速下五种化合物的柱效 式中，tR为保留时间（min）；F为体积流速（mL 损失率Q，结果列于表1中。 min-1）；nc为在没有柱外效应时色谱柱的真实理论 板数，δ2和δ2分别表示柱内因素和柱外效应对色 谱峰方差的贡献，其单位分别为min2和μ蘈L2。在文献 （2）中，δ2是由线性外推法求得的，δ是基于高斯峰 的半峰宽公式求得的，因此所得的结果并不代表真 实值。 EMG模型在目前被认为是描述色谱峰的最好 模型。此模型假设组分在色谱柱内呈对称的高斯分 布，柱内效应用时间衰减常数τ描述，τ2表示柱外效 应对色谱峰方差的贡献。但前已述及，谱带在柱内不 是对称的，文献（3）中作者已指出，EMG函数中时间 衰减常数τ和高斯峰标准偏差δ以及流动相流速F 之间存在以下关系： τ=a+b/F+cδ (3) * 通讯联系人 本文收稿日期：1993年12月15日，修回日期：1994年4月4日 对文献（3），（4）中的有关数据加以分析知，τ/δ 作者在本文中提出的看法尚需进一步做实验验 及c值均随tR增大而减小，但是二者减小的速度不 证，才能作出结论。但至少有一点可以肯定，即在柱 同。在tR较小时，c值减小的速度较τσ减小的速度 后附加有流动相时，式（6）不适用。 快，Q值增加；tR增大到一定的值后，τ/σ值减小的速