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DNA酶试验标准操作规程
1．目的
规范DNA酶试验标准操作规程。
2．原理
某些细菌可产生细胞外DNA酶。DNA酶可水解DNA长链，形成数个单核甘酸组成的寡核苷酸链。长链DNA可被酸沉淀，而水解后形成的寡核苷酸则可溶于酸，当在菌落平板上加入酸后，若在菌落周围出现透明环，表示该菌具有DNA酶。
3．试剂
3.1 DNA琼脂成分
DNA（脱氧核苷酸） 2.0g 胰蛋白胨 15g
D大豆胨 5.0g 氯化钠 5.0g
琼脂 20g 蒸馏水 1000ml
pH 7.2～7.4
3.2 制备 将上述成分混合于蒸馏水中，加热溶解，校正pH，分装三角烧瓶，经115℃灭菌15分钟。倾注于灭菌平皿，冷藏备用。
4．质控
粘质沙雷菌ATCC14041阳性，大肠埃希菌ATCC25922阴性。
5.操作步骤
将待检菌点状接种于DNA琼脂平板上，35℃培养18～24小时，在细菌生长物上加一层1mol/L盐酸（使菌落浸没）。
6.结果判断
菌落周围出现透明环为阳性，无透明环为阴性。
7.注意事项
培养基表面凝固水需烘干，以免细菌呈蔓延状生长。也可在营养琼脂的基础上增加0.2%DNA。
8.临床意义
肠杆菌科中的沙雷菌和变形杆菌可产生DNA酶，革兰阳性球菌中只有经黄色葡萄球菌产生DNA酶，因此可用于鉴定。
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