MH培养基配制标准操作规程.doc

MH培养基配制标准操作规程 1．目的 规范M-H培养基配制标准操作规程，保证培养基质量。 2．原理 M-H培养基用Mueller-Hinton琼脂（水解酪蛋白琼脂）配制，淀粉为保护性胶体，能对抗细菌中的毒性物质，水解酪蛋白含多种氨基酸，牛肉浸膏能提供细菌氮源的主要营养物质。药敏试验中，为保证结果重复性及抑菌环的大小、清晰，因此培养基不含对抗生素及磺胺药物的拮抗剂。 3．用途 用于普通细菌的抗菌药物敏感试验。 4．配方 成品OXOID M-H干粉38g、蒸馏水1000ml，pH7.1～7.5。 5.操作步骤 将上述成分混合，校正pH。121℃高压灭菌15分钟。冷至50℃左右，无菌定量吸取25ml于直径9cm的无菌平板内，凝固后冷藏备用。琼脂层厚4mm. 6.储存条件 2～8℃冰箱。 7.有效期 实验室自行规定，确保培养基质量。 8. 质量控制 8.1 质控频度 每次新配制时做质控 8.2 质控方法及结果见表5-20. 表5-18 配制M-H培养基质量控制方法及结果 试验 方法 结果 无菌试验 质量检测 平行试验 100块抽检5%，100块随机取10块，35℃，CO2培养24小时 在M-H培养基上涂布粪肠球菌ATCC29212，用甲氧苄啶∕磺胺甲噁纸片进行药敏试验，35℃培养24小时 做质控时，取新旧批号的培养基同时做 无细菌生长 出现一个边缘清楚的抑菌圈，直径应≧20mm 9.注意事项 9.1 倾注琼脂量为25ml，平板深度4mm。若太薄，易产生假敏感。若太厚，平皿中的抗生素往下扩散而使抑菌环变狭窄，产生假耐药性。 9.2 pH会影响某些抗生素的活性。实验时不可将平板培养在CO2培养箱中，否则会在琼脂的潮湿表面产生碳酸而降低pH值，将影响各种抗生素的扩散速度、抑菌环大小。