不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响.pptVIP

不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响 沈阳药科大学 延胡索介绍 延胡索（Corydalis Rhizoma）为多年生罂粟科草本植物延胡索（Corydalis yanhusuo W.T.Wang）的干燥块茎[1]，因有活血、止痛、利气的功效，临床上多用于治疗脘腹疼痛、经闭痛经、产后瘀阻[2]。生物碱是中药延胡索中的主要有效成分，其中药材中含有的大部分为结合态的生物碱，只有碱性较弱的成分以游离态的形式存在[3]。 延胡索不同炮制品炮制方法 醋炙延胡索：将从中药材公司购买的同一批号的延胡索生 品洗净，晾干，20%的陈醋作为浸泡剂将生品浸泡，醋液被药材 完全吸尽后，生品文火上炒干。 2.1.2 醋煮延胡索：20%陈醋将延胡索生品浸润，浸润时间以醋 液被生品完全吸尽为准，后武火将浸润完成后的药材药液煮沸 后，文火将溶液蒸煮，醋液吸收完全后置于 CO2 烘箱中进行干 燥。 2.1.3 醋烘延胡索：延胡索生品适量，称重后 20%的陈醋进行浸 润，待药材中的醋液被药材吸尽后，置设定温度为 120℃的 CO2 烘箱中，烘烤 40min，取出后在室温下晾干。 2.1.4 酒炙延胡索：中药延胡索生品适量，20%的黄酒浸润待浸 泡溶剂吸收完全后，文火将浸润生品炒干。 色谱条件的选择 AgilentC1（8 250mm×4.6mm，2.5μm）为实验过程中的色谱柱，乙腈：0.1%磷酸溶液（三乙胺调节 pH 为 5.2～5.4）=72∶28 为流动相，柱温为室温，检测波长为 282nm，进样量为 10μL，流速为 1.0mL/min。延胡索乙素、去氢紫堇碱有较好的分离，按照延胡索乙素色谱峰进行计算理论塔板数3000。如下图。 供试品溶液的配制：取中药延胡索生品及不同炮制品，精密称定后粉碎机打成细粉，分别过 40 目筛后置于带瓶塞的三角锥形瓶中，150mL 水溶液定量，超声 30min，后静置到室温后将上层溶液滤过，按照上述步骤重复操作 2 次，合并 3 次超声滤液后蒸干，残渣加入 50mL 水溶解后加入浓氨水 10mL，乙醚溶液作为萃取剂连续萃取 3 次，每次 30mL，合并 3 次萃取液后置于烧杯中，水浴锅上蒸干，蒸干后的浓缩品适量，精密称定，置于 5mL容量瓶中，甲醇溶液溶解后定溶至刻度，得供试品溶液。 2.4 对照品溶液的制备：称取延胡索乙素、去氢紫堇碱对照品适量，精密称定，置于 10mL 容量瓶中，甲醇溶液定溶至刻度，即得对照品溶液。线性关系考察：精密吸取延胡索乙素、去氢紫堇碱对照品0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0mL 置于 2mL 容量瓶中，甲醇溶液定溶至刻度，按照上述色谱条件进样，以色谱峰面积作纵坐标，对照品的含量作为横坐标，进行回归处理，得到线性回归方程分别为：Y=4.12×105-2.52×103（r=0.9998）（去氢紫堇碱在0.345～3.315μg 范围内线性关系良好）； Y=2.43×105-3.12×10（4 r=0.9997）（延胡索乙素在 0.190～1.359μg 范围内线性关系良好）。 2.6 精密度考察：吸取延胡索乙素对照品溶液，按照“2.2”项下的色谱条件重复进样 5 次，峰面积的 RSD 值为 0.21%，表明高效液相色谱仪的精密度好。 2.7 稳定性考察：取“2.3”项下的供试品溶液，分别在 0、2、4、8、12、24h 按照色谱条件进样 10μL，测定峰面积值，其 RSD 值为1.95%，表明供试品溶液在 24h 内有较好的稳定性。 2.8 重复性考察：取同一批延胡索样品分别重复进样 5 次，测定延胡索乙素的含量，其 RSD 值为 1.75%，表明该方法的重复性较好。 正交试验供试品的制备与测定：分别取荜拨粉末约 1g 置于九个烧杯中，按表 2 设计的实验条件分别测定胡椒碱含量，结果见表 3。 加样回收率试验：取 5 份已知含量的样品，延胡索乙素含量为测定参照，将适量的延胡索乙素对照品溶液加入 5 份样品，按照色谱条件进样，以回归方程进行样品含量的测定，计算加样回收率，见表 1。 样品含量测定：各炮制品供试品溶液，按照“2.2”项下的色谱条件进样测定峰面积，按照线性回归方程对含量进行计算，见表 2。