保健食品中肉碱的测定.doc

保健食品中肉碱的测定 Determination of carnite in health food 1．范围 本方法规定了片剂、胶囊保健食品中肉碱的测定方法。 本方法适用于以肉碱为主要原料的片剂、胶囊中肉碱的测定。 本方法最低检出量为0.27ug。 本方法最佳线性范围：0.050mg/mL—2.0mg/mL。 原理 试样中的肉碱以0.5mmol/L的盐酸超声提取，反相色谱分离，与标准品的保留时间比较定性，以峰面积外标法定量。 试剂 除特殊说明，所用试剂均为分析纯。实验用水为去离子水或同等纯度的蒸馏水。 3．1 磷酸氢二钾 3．2 辛烷磺酸钠 3．3 0.50mmol/L盐酸 3．4 肉碱标准溶液：精密称取干燥至恒重的肉碱标准品(含量98%)0.0200g，用0.50mmol/L盐酸溶解并定容为10.0mL，此溶液浓度为2.0mg/mL。 仪器 4．1 HPLC系统，配有紫外检测器和色谱工作站； 4．2 超声波提取器； 4．3 溶剂微孔过滤器带0.45um水相滤膜。 分析步骤 5．1 试样预处理：准确称取粉碎并混合均匀的式样0.50g（含肉碱约40毫克）；液体试样取5.0mL，于50mL容量瓶中，加入0.50mmol/L盐酸约35mL，超声提取10min，用0.50mmol/L盐酸定容，混匀，过滤，弃初滤液数毫升，收集滤液，过0.45um水相滤膜，为试样处理液。供HPLC分析。 5．2 试样分析 5．2．1 色谱条件：Shim—pakCLC ODS 柱；4.6×200mm,10um； 5．2．2 流动相：0.05mol/L(3.4g) 磷酸氢二钾溶液，0.002mol/L辛烷磺酸钠; 10%乙腈；PH2.5。 5．2．3 流速：0.8mL/min； 5．2．4 检测器：紫外检测器；检测波长： 210nm； 5．3 标准曲线：分别取标准溶液0.0,0.25,0.50,1.0,2.0,2.5,5.0mL标准溶液（3.4）于5mL比色管中；用0.50mmol/L盐酸稀释并定容为5.0mL，分别进样20uL进行色谱分析。用标准浓度—峰面积绘制标准曲线。 5．4 试样测定：取20uL试样处理液（5.1）注入色谱仪中，以保留时间定性， 面积定量。 5 色谱图 5. 6分析结果表述 试样中肉碱的含量按5.5.1式计算 5．6．1 计算 C×V X= m 式中： X— 为试样中肉碱的含量，mg/g； m—为试样质量，g； C—为试样处理液中肉碱的浓度，mg/mL； V—为试样处理液体积，mL。 5.6.2 结果表示 结果保留三位有效数字。 6 . 技术参数 重复测定值的RSD小于6.0%。 回收率：90.3~101.1%