食品安全仪器检测技术教材(PPT 70页).pptVIP

3.1.6气相色谱定性与定量分析 定性与定量分析 定性分析 气相色谱本身不具备鉴定功能，定性分析的主要依据是保留值（气相或液相操作中，当仪器的操作条件保持不变时， 任一物质的色谱峰总是在色谱图上固定的位置出现， 即有一定的保留值），这给定性分析带来一定难度。 气相色谱与质谱、光谱等联用，既充分利用色谱的高效分离能力，又利用了质谱、光谱的高鉴别能力，加上运用计算机对数据的快速处理和检索，为未知物的定性分析开辟了一个广阔的前景。 柱温是非常重要的色谱参数，直接影响到分离效能和分析速度。 定性分析 （1）利用保留值的定性分析 ①利用已知纯物质对照定性。在一定操作条件下，任何组分都有一个确定的保留值，基于这一特征，样品和纯物质保留值的直接比对可以作为定性的依据。如果样品较复杂，可在未知混合物中加入已知纯物质，通过未知物中峰的变化，来确定未知物中成分。 ②利用保留值的经验规律定性。实验证明，在一定柱温下，同系物的保留值对数与分子中的碳数成线性关系，即为碳数规律；在同一族的具有相同碳数的异构体的保留值对数与其沸点成线性关系，即为沸点规律。 ③利用相对保留值定性。利用保留值定性，样品和纯物质的分析条件必须一致。只要保持柱温、固定液不变，即使载气流速等条件有所变化，也不会影响相对保留值。因此，利用相对保留值定性比直接用保留值定性更为方便、可靠。 3.1.6气相色谱定性与定量分析 ④利用保留指数定性 保留指数又称Kovats 指数，是一种重现性较其他保留数据都好的定性参数，可根据所用固定相和柱温直接与文献值对照，而不需标准样品。 ⑤双柱、多柱定性不同物质 在同一色谱柱上可能具有相同的保留值，用两根或多根不同极性的色谱柱进行分析，考察样品的纯物质保留值的变化作为定性依据。 （2）与其它方法结合定性 气相色谱与质谱、光谱、核磁共振等仪器，以及利用化学方法配合进行未知组分定性，在确定未知化合物结构时是非常有效的途径。 3.1.6气相色谱定性与定量分析 定量分析 在气相色谱法中的定量分析就是根据色谱峰的峰高或峰面积来计算样品中各组分的含量。 常用的定量方法有标准曲线法、外标法、面积归一化法和内标法。 3.1.6气相色谱定性与定量分析 （1）外标法 已知浓度的标准样品与待测样品在完全相同的条件下进行色谱分析，以两者的峰高或峰面积的比较计算样品的含量，有直接对比法和标准曲线法。 直接对比法是待测样品与标准样品的峰值直接比较计算样品含量；标准曲线法以标准样品作浓度与峰值关系图，然后根据测得的待测样品峰值从峰值—浓度关系曲线图查浓度。 外标法较为简便，不需要校正因子，但进样量要求十分准确，操作条件也需严格控制。 3.1.6气相色谱定性与定量分析 ? 3.1.6气相色谱定性与定量分析 ? 3.1.6气相色谱定性与定量分析 3.1.6气相色谱定性与定量分析 ? 3.2高效液相色谱技术 高效液相色谱法原理及分析 1. 3. 2. 液相色谱法的基本原理 液相色谱的分类 定量分析方法 概述 高效液相色谱是利用溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。 色谱法是一种分离技术。 混合物分离过程：试样中各组分在 色谱分离柱中的两相间不断进行着的 分配。 一相固定不动，称为固定相。 另一相是携带试样混合物流过固定 相的液体，称为流动相。 3.2.1高效液相色谱原理 当混合物进入色谱柱后，就在固定相、流动相之间不断地进行分配平衡。不同的化合物，分子结构不同，理化性质不同，所以在两相中存在的浓度也各不相同。固定相中存在量多的化合物，冲洗出柱子的时间就长，反之则短。这与分配系数K有关： K值小，先流出柱子，K值大的，保留作用强，后流出柱子。 3.2.2高效液相色谱原理 3.2.3高效液相色谱分类 按流动相和固定相特征分为 正相色谱、反相色谱 按分离目的分为 分析型、制备型 按分离机理分为 吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱等。 3.2.3高效液相色谱分类 1、吸附色谱法： 固定相：吸附活性强弱不等的吸附剂（硅胶、氧化铝、聚酸胶）等。 流动相：各种极性的洗脱剂 用途：非极性溶剂中、具有中等相对分子质量且为非离子型的试样。 特别适用于分离异构体 分离原理：物质在固定相上的吸附作用不同 2、分配色谱法： 原理:根据各待测物在互不相溶的两溶液中的溶解度不同，因而具有不同的分配系数。在色谱柱中，随着流动相的移动，这种分配平衡需进行多次，造成各待测物的迁移速率不同，从而实现分离的过程。 流动相: HPLC分析中，为防止固定相的流