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(1)本实验采用的是包埋法,而制备固定化酶则不宜用此法,原因是 。 实验过程中用CaCl2溶液处理的目的是________________________ ________________________________________________________。 (2)在利用葡萄酒制作葡萄醋时,除控制好温度等条件外,还要注意控制气体条件,因为醋酸菌是 (填“需氧”或“厌氧”或“兼性厌氧”)型细菌。 (3)天然酿酒酵母通常缺乏分解淀粉的酶类,用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂过程转化为葡萄糖才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因,再通过 技术对目的基因大量扩增后,将其插入质粒以构建 , 并导入酿酒酵母菌体内,以期得到能迅速分解淀粉的酿酒酵母菌。 (4)为筛选出能高效利用淀粉的转基因酿酒酵母菌,将该工程菌接种在 的固体平板培养基上,培养一段时间后,加入碘液,选择 的菌落进一步纯化培养。 【解析】(1)由于酶分子小,易从多孔性物质中漏出,因此多使用化学结合法与物理吸附法固定化,而细胞体积大,难以被多孔性物质吸附或结合,因而应用包埋法固定。 (2)醋酸菌的新陈代谢类型是异养需氧型,因此醋酸发酵需要不断通入氧气(空气)。 (3)在对酵母菌进行遗传改造时,扩增目的基因的技术是PCR技术。插入目的基因的质粒称为基因表达载体。 (4)为了筛选能高效利用淀粉的转基因酿酒酵母菌,培养基中应富含淀粉。在富含淀粉的培养基中加入碘液后,培养基会变蓝,而在分解淀粉的酵母菌菌落周围,淀粉被酵母菌利用,就会形成不变蓝的透明圈,并且透明圈的大小与酵母菌分解淀粉的能力呈正相关。 答案:(1)酶分子很小,容易从包埋材料中漏出 Ca2+与海藻酸钠反应形成不溶于水的海藻酸钙凝胶(使凝胶珠形成稳定结构) (2)需氧 (3)PCR 基因表达载体 (4)富含淀粉 透明圈大 【解题指南】(1)题干关键词:“食品种类多,酸碱度范围广”。 (2)图中关键信息:木瓜蛋白酶保持活力的pH范围最广。 (3)探究目的:对酶保护剂浓度和提取液pH进行优化。 【解析】(1)结合图形和文字可知,在题目中已经提供了信息“食品种类多,酸碱度范围广”,所以选择的食品添加剂应该有较广的酸碱适应范围,从图中可以看出木瓜蛋白酶的适应范围最广,所以可以选作食品添加剂。酶的活力一般用酶催化的底物消耗量或者产物的生成量来表示。 (2)实验设计时应该明确实验目的,这里的实验目的是探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pH,所以我们可以将酶保护剂的浓度和提取液的pH作为自变量,因变量为单位时间内底物的消耗量。 答案:(1)木瓜蛋白酶 木瓜蛋白酶的活力基本不受pH的影响 单位时间内底物的消耗量或产物的生成量 (2)课题:探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pH 单位时间内 底物的消耗量 提取液的pH 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 酶保护 剂的 浓度 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 考点三 固定化酶和固定化细胞技术 1.直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的比较: 比较 项目 直接使用酶 固定化酶 固定化细胞 营养 不需要 不需要 需要 缺点 酶易失活,难以回收,影响产品质量 只能催化一种化学反应 反应物不易于接触,反应效率较低 优点 催化效率高,低能耗,低污染 可以回收利用,提高产品质量 成本低,操作容易 实例 果胶酶 固定化葡萄糖异构酶 固定化酵母细胞 2.固定化酶和固定化细胞的常用方法: 方 法 固定方式 适用对象 缺 陷 物理 吸附法 将酶分子吸附在载体表面上 固定化酶 体积大的细胞难以被吸附或结合 化学 结合法 将酶相互连接起来 固定化酶 包埋法 将酶或细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中 固定化 细胞 体积小的酶分子易从包埋材料中漏出 3.固定化酵母细胞并发酵产生酒精: (1)实验流程及注意事项: (2)海藻酸钠溶液的浓度对包埋酵母细胞数量的影响。 ①浓度过高,将很难形成凝胶珠。 ②浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少。 【高考警示】固定化技术的两点提醒 (1)固定化技术对酶的影响:固定化酶改变了酶的存在状态,不改变酶的特性,因此利用固定化酶仍要严格控制温度、pH等环境条件,以利于酶发挥作用。 (2)正确理解固定化酶的优点:固定化酶能够连续使用,但不是永久使用。酶是具有生物活性的大分子,因此随着使用次数的增多,酶活性也会降低,如果酶活性降低到一定程度,就会失去使用价值。 【考题回访】 (2014·浙江高考改编)下面是关于固定化酶和细菌培养实验的问题,请回答: (1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验(已知糊精遇KI-I2溶液显
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