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实验七酶的性质实验 酶是生物体内具有催化功能的蛋口质，因此也叫生物催化剂。生物体内存在多种多 样的酶，从而使生物体在温和的条件下能够迅速完成复杂的生物化学反应。酶冇的是单 纯蛋口质，有的是结合蛋口质。因此，凡是能够引起蛋口质变性的因素，都可以使酶丧 失活性，结合蛋白质的非蛋白部分叫做辅酶或辅基。习惯上，将与蛋白质结合的紧而不 易分离的非蛋白部分称为辅基，辅基不能通过透析的方法从酶分子屮除去；而将与蛋白 质结合的不紧而易分离的非蛋口质部分称为辅酶，辅酶可以通过透析的方法从酶分子中 除去。目前许多酶已经能够制成结品。 酶貝?有高度的专一,性（特异性）。温度和pH对酶的活性有显著的影响。能使酶的活 性增加的作用称为酶的激活作用，使酶的活性壇加的一些物质称为酶激活剂；能使酶的 活性减弱的作用称为酶的抑制作用，使酶的活性减弱的一些物质称为酶的抑制剂。激活 剂与抑制剂常表现某种程度的特异性。 物质代谢是生命现彖的基本特征。在机体屮了解温度对没活性的影不断进行着的同 化作用和异化作用，绝大多数都是在酶的影响卜?进行的。所以，生活机能在某种程度内 可以说是曲机体内酶类的含量及活性决定的。食品、发酵、制药、制革、造纸、纺织等 工业部门以及临床检验等都和酶有密切关系。因此，酶的研究在牛物化学理论上及牛产 实践上都占有极其重要的位置。 温度对酶活性的影响 一、 口的和要求 通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性，了解温度对酶活性的影响。进一步明确最 适温度的概念。 二、 原理 酶的催化作用受温度的影响很大，一方面与一般化学反应一样，提高温度可以壇加 酶促反应的速度。通常温度每升高10°C,反应速度就加快倍左右，通常用温度系数表 示，一般情况下的温度系数约等于2,最后反应速度达到最大值。另一方面，酶是一种蛋 白质，温度过高可引起蛋白质变性，导致酶的失活。因此，反应速度达到最大值以后， 随着温度的升高，反应速度反而逐渐卜?降，以至完全停止反应。反应速度达到最大值时 的温度称为某种酶的最适温度。高于或低于最适温度时，反映速度逐渐降低。大多数动 物酶的最适温度为37°C-40°C,植物酶的最适温度为50°C-60°Co但是，一种酶的最适温 度不是完全固定的，它与作用时间的长短冇关，反应时间增长时，最适温度向数值较低 的方向移动。通常测定酶的活性时，，在酶反应的最适温度卜?进行，测定酶促反应的初 速度。为了维持反应过程中温度的恒定，一般利用恒温水浴等恒温装置。酶对温度的稳 定性与其存在的形式有关。大多数酶在干燥的固体状态下比较稳定能在室温下保持数月 以至一年，在低温下保存的时间更2,因此，酶制剂一般以冻干粉状在低温下冷冻保存。 溶液屮的酶，一般不如固体的酶稳定，月?易为微生物所污染，通常很难长期保存而不丧 失其活性，溶液状态的酶，在保存时都要加入等体积的甘油，并贮存在4°C冰箱中，酶活 性可保持两周至几个月。酶在高温下就更不稳定了。 酶的活性通常是用测定酶作用基质在酶作用前后的变化来进行观察的。木实验在不 同温度条件下使淀粉酶作用于其作用基质——淀粉，并用碘液来检查酶促淀粉水解程度, 来说明温度与酶活力Z间的关系。 唾液淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种不同大小分了的糊精及麦芽糖。它们遇碘各呈 不同的颜色。直链淀粉（即可溶性淀粉）遇碘呈蓝色；糊精按分子大小从人到小的顺序, 遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色。最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈现颜色，使整个反 应系统呈现出加入的碘液的颜色。由于在不同的温度下唾液淀粉酶的活性高低不同，， 则淀粉被水解的程度不同，所以，可由酶反应混合物遇碘所呈现的颜色来判断。 W4 ngSLB協甘的分丫弟斜 W4 ngSLB協甘的分丫弟斜 三、仪器设备和试剂 （一）仪器1.移液管:lmlx2, 2mlxl 2.试管3支，试管架3.恒温水浴锅（37°C、 0°C、100 °C） （二）试剂 1.1%淀粉溶液（含0.3%的NaCl）:将lg可溶性淀粉及0.3gNaCl,混悬于5ml蒸馆 水屮，搅动后缓慢倒入60ml沸腾的蒸谓水屮，搅动煮沸1分钟，凉至室温后加蒸谓水至 100ml,置于冰箱中贮存。 2?淀粉酶液：每人用自来水漱口 3次，然后取20ml蒸谓水置于一小烧杯屮，向烧杯 中叶入一口唾液，摇匀，纱布过滤，取滤液加水至20ml,制成1 ： 20稀释的唾液淀粉酶 液，备用。（提取：实验者先用水漱口清洁口腔，然后含一小口（约5mL）蒸镭水于口 屮轻嗽一、二分钊稀释：将酶提取液用水定容至lOOmLo作为唾液淀粉酶的样品液。（由 于不同人或同一人不同时间收集到的唾液淀粉酶的活性并不相同，稀释倍数可以是50? 300倍，甚至超过此范围。） pH7.0 的磷酸缓冲液（PB）：取 772.5ml 0.2M Na2HPO412H2O （称取 Na2HPCU?12 H