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K-B 法 E-试验 注:OX为苯唑西林;FOX为头孢西丁 1.测定方法 OX(K-B法、MIC法)仪器法、FOX纸片法、PCR检测mecA基因、PBP2a等。 2.MRS 对所有?内酰胺类及与酶抑制剂的复合剂耐药 OX OX FOX FOX OX MRS筛选试验 FOX HLAR的筛选 CN120 AMP 注:CN120为高浓度庆大霉素;AMP为氨苄西林 1.测定方法 纸片扩散法和肉汤稀释法 2.肠球菌对头孢菌素、氨基苷类、克林霉素类及磺胺类药物天然耐药 3.CN120为R时,氨基苷类药物与青霉素类药物有协同作用 ESBLs双纸片确证试验 1.CTX/CA比CTX抑菌 圈或CAZ/CA比CAX 5mm即为阳性 2.若ESBLs阳性,对青霉素类、所有头孢菌素类及单环类抗菌素耐药 CTX CTX/CA CAZ CAZ/CA 注:CTX为头孢噻肟;CTX/CA为头孢噻肟/棒酸 CAZ为头孢他啶;CAZ/CA为头孢他啶/棒酸 AmpC酶检测 FOX 注:FOX为头孢西丁 1.AmpC酶可分为诱导型、去阻遏持续高产型和质粒介导型 2.若AmpC酶阳性,对青霉素类、第一、二、三代头孢菌素、单环类及头霉类抗菌素耐药 温州医科大学 检验医学院 温州医科大学附属第一医院 临 床 病 原 体 检 测 余方友 第九章 临 床 病 原 体 检测 主要内容 一、标本采集、运送和检测方法 二、细菌耐药性检查 三、临床感染常见病原体检查 四、医院感染常见病原体检测 导 言 1.临床病原体实验诊断方法遵循的原则 2.临床病原体检查的目的:确定感染的发生和性质;早期提供治疗方案;采取预防措施防止感染传播。 标本前处理 初步诊断 确定诊断 一、细菌检验标本采集与送检的基本原则 1.注明被检人姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况, 2.尽量在抗生素使用前采集标本。 3.在采集血液,脑脊液,穿刺液等标本时,应严格执行无菌操作,避免杂菌污染。 4.立即送到实验室,某些细菌还应注意保温、保湿的措施。 5.盛标本容器须经灭菌处理,勿用消毒剂 一、常见标本的采集(血液与骨髓) 1.采血部位多为肘静脉,切忌在静滴抗菌药物的静脉处采集血标本,无菌操作。 2.每次采血量为5ml左右, 培养基与血液之比以10:1为宜。 3.选择体温上升或高温时采血。 4.每例至少采血3次,注意区别 感染菌和皮肤污染菌。 一、常见标本的采集(尿液) 1.中段尿采集:最常用的方法。采样前须消毒尿道口将中段或近后段的尿液留于无菌容器中。 2.导尿管采集尿液:可减少污染,但易引起逆行感染,除非必要,须避免用此方法。不可从集尿袋下端管口留取标本。 3.膀胱穿刺采集尿液:病人耻骨上皮肤消毒后,以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液厌氧菌培养或婴幼儿。 一、常见标本的采集(粪便 ) 1.挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约2-3克盛于灭菌容器中送检,也可用拭子挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基中送检。 2.对不易获取粪便者,如婴幼儿可用 直肠拭子采集送检。 一、常见标本的采集(呼吸道标本) 1.自然咳痰:清水反复漱口后用力咳嗽, 从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器内送检。以清晨第一口痰为好。 2.气管镜下采集法、气管穿刺法:下呼吸道病原学的理想标本,但不易接受和推广。 3.痰标本采集后应及时送检和处理,最好不超过1小时,放置时间长可导致肺炎链球菌,流感嗜血杆菌等的检出率明显下降。 一、常见标本的采集(脑脊液等无菌体液) 1.严格无菌条件下采集标本。 2.尽量采集多的标本送检。 3.尽快送检或床旁接种可 提高阳性率,特殊标本 需保温送检。如脑膜炎奈瑟菌、 肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等。 一、常见标本的采集(伤口、烧伤创面、脓肿及其他) 1.无菌生理盐水清洗病灶表面后,用无菌拭子取病灶深部的脓液和分泌物,立即送检。 2.对未溃破的脓肿直接用碘酒、酒精消毒皮肤后,以无菌注射器抽取脓液送检,也可以切开排脓时用无菌拭子采样。 3.生殖道标本包括尿道口分泌物、外阴糜烂物、宫颈口分泌物、前列腺液等,应注意保温。 二、检查方法 1.直接涂片、镜检:初步诊断但阳性率低。如抗酸染色
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