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盐酸利多卡因眼用凝胶有关物质方法研究 仲益(江苏省泰州市姜垠中医院 江苏姜垠225500) 【摘要】目的 研究盐酸利多卡因眼用凝胶中的有关物质检查方法。方法HPLC 法。结果 木方法专属性好，灵敏度度高。结论 木方法适合于盐酸利多卡因眼 用凝胶中有关物质的检查。 【关键词】盐酸利多卡因眼用凝胶 物质 研究 方法 【中图分类号】R927 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752 (2013) 20-0028-02 1仪器与试药 1.1仪器 Waters2695高效液相色谱仪(Waters2996检测器、Waters2487检测器) Agilentl200高效液相色谱仪(DAD检测器) 色谱柱：AgilentTC-C18 (4.6times;250mm) 汉邦 0DS-AJS (4.6times;250mm) 月旭 AQ-C18 (4.6times;250mm) 1.2试药 磷酸二氢钠分析纯南京化学试剂厂 磷酸氢二钠分析纯南京化学试剂厂 磷酸 分析纯 南京化学试剂厂 甲醇 色谱纯 美国天地 乙睛 色谱纯 美国天地 2产品及现状 盐酸利多卡因眼用凝胶 厂家：Akorn Incorporated,商品名:AkornTM, 包装：聚酯滴眼剂瓶装，贮藏：密封避光在15°C?25°C条件下保存，规格： 5ml:175mg,批号:1B33B,有效期至2013年1月。 盐酸利多卡因原料BP2009标准详细列出了盐酸利多卡因可能存在的杂 质为：杂质A为起始原料2,6■二甲基苯胺，杂质B为起始原料二乙胺部分被氧化 后的副反应产物，杂质C为起始原料氯乙酰氯中混入杂质乙酰氯带进的副反应产 物，杂质D为起始原料二乙胺中混入的乙胺带进的副反应产物，杂质E为起始原 料二乙胺中混入的氨带进的副反应产物，杂质F为起始原料2,6■二甲基苯胺中混 入的2,3■二甲基苯胺带进的副反应产物，杂质G为起始原料二乙胺中混入的2- 丙胺带进的副反应产物，杂质H为合成利多卡因原料的关键中间体N■氯乙酰基 26■二甲苯胺，杂质I为起始原料2,6■二甲基苯胺中混入的2,4?二甲基苯胺带进 的副反应产物，杂质J为起始原料2,6■二甲基苯胺中混入的2,5■二甲基苯胺带进 的副反应产物，杂质K为起始原料二乙胺中混入的甲乙胺带进的副反应产物。 国内外利多卡因原料及制剂均控制“2,6■二甲基苯胺”，其他杂质归入最 大单个杂质，实施限量控制。文献［染料产品中23种有害芳香胺的限量及检测方 法］显示，在已知的23种有害芳香胺中，包含2,6二甲基苯胺等，长期接触该类 物质可能引起具有急性肝中毒、肾损伤及致癌的毒性反应。 故研究者结合国内外利多卡因原料及制剂标准，初步确定对盐酸利多卡 因眼用凝胶中可能含有的“2,6?二甲基苯胺、N?氯乙酰基?2,6■二甲苯胺”用外标 法实施定量限量控制，其他杂质归入最大单个杂质，实施限量控制，并参照 BP2009原料标准，用“2,6■二甲基苯胺”及“N■氯乙酰基?2,6■二甲苯胺”的分离 度考察系统适用性条件。 3方法及结果 3.1流动相选择 取“盐酸利多卡因”、“乙6■二甲基苯胺（杂质I ）”及“N■氯乙酰基?乙6? 二甲苯胺（杂质II）”，用流动相制成各为35mu;g/ml的混合溶液，在检测波长 为254nm及230nm的条件下，考察杂质I与杂质II的分离度及盐酸利多卡因峰 型，结果表明流动相1条件下杂质与利多卡因的分离度良好，且主峰利多卡因峰 形较好。 3.2测定波长选择 多波长检测数据显示：杂质I、II及盐酸利多卡因在254nm处的吸收 均小于在230nm处的吸收，参照盐酸利多卡因将我公司研制的盐酸利多卡因眼 用凝胶的有关物质检测波长确定为230nmo 3.3供试品浓度选择 BP2009原料标准中，有关物质检查供试液浓度为5mg/ml,中国药典 2010版原料标准中，有关物质检查供试液浓度为2mg/ml,而眼用凝胶的浓度为 35mg/ml,稀释10倍后浓度为3.5mg/ml,以3.5mg/ml的盐酸利多卡因溶液为基 础，逐级稀释，测得盐酸利多卡因定量限浓度为1.4mu;g/ml,约为供试液浓度 的1/5000,可见，该浓度下0.02%的杂质可被检出。故研究者确定有关物质检查 供试液浓度为3.5mg/mlo 3.4专属性考察 供试品溶液中主峰保留时间为13.225min,杂质保留时间分别为 4.903min 8.027min,主峰与相邻杂质的分离度为11.84。径苯甲纤维素E4M、 氯化钠及空白辅料溶液均在3min前出峰，对杂质及主峰的出峰无影响，专属性 强。 3.5方法学研究 3.5.1杂质I （已知杂质2,6■二甲基苯胺）的方法学研究 3.5.1.1定位试验及响应值考察 结果显示：2,6■二甲基苯胺与盐酸利多卡因的相对保留吋间为0.646,响 应