原 位 杂 交 原理.pptVIP

原 位 杂 交 原理 原位杂交技术是分子生物学和组织化学成功结合的产物。 是以特定标记的已知序列核酸作为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交并对其实行原位检测的方法（in situ hybridization）。 基本原理是含互补序列的标记DNA或RNA片段，即探针，在适宜的条件下与细胞内特定的DNA或RNA形成稳定的杂交体。 应 用 于60年代末期，由于核酸分子杂交的特异性高，并可精确定位，因此该技术已广泛地应用于医学分子生物学的研究中，对于研究细胞的生物学功能、基因表达的规律、肿瘤发生机制及病原微生物的检测，有广泛的应用前景。如： （1）用标记的探针与分裂中期染色体DNA杂交以研究染色质中特定核酸序列在染色体中的精确定位； （2）与细胞内RNA进行杂交以观察该组织细胞中特定基因表达水平； （3）用特异性的细菌、病毒的核酸作为探针对组织、细胞进行杂交，以确定有无该病原体的感染等。 优 点 （1）能在成分复杂的组织中进行单一细胞的研究而不受同一组织中其它成分的影响，因此对于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA研究更为方便； （2）由于原位杂交不需要从组织中提取核酸，对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性，并可完整地保持组织与细胞的形态，更能准确地反映出