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必修2遗传与进化 遗传的分子基础·人类对遗传物质的探索过程(要求: Ⅱ)·DNA分子结构的主要特点(要求: Ⅱ)··DAN分子的复制(要求: Ⅱ)··人类对遗传物质的探索过程(43-46页)① 1928年,格里菲斯实验② 1944年,艾弗里等实验③1952年,郝尔希和蔡斯实验 方法——同位素标记法染色体的结构思考:染色体是由什么物质组成?DNA与蛋白质究竟哪种是遗传物质?蛋白质口说无凭,实验见分晓1、格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验①将R型活菌注入小鼠体内一段时间后小鼠正常注射R型细菌→对动物无害→动物体内出现R型细菌——说明R型肺炎双球菌无毒性1、格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验②将S型活菌注入小鼠体内一段时间后小鼠死亡注射S型细菌→使动物死亡→动物体内出现S型细菌——说明S型肺炎双球菌有毒性 1、格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验③将杀死的S型菌注入小鼠体内一段时间后小鼠正常注射杀死的S型细菌→对动物无害→动物体内不出现S型细菌——说明加热后S型肺炎双球菌毒性消失1、格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验④将R型活菌与杀死的S型菌注入小鼠体内一段时间后小鼠死亡细菌发生转化,性状的转化可以遗传。为什么第四组实验:将R型活细菌和加热杀死后的S型细菌混合后注射到小鼠体内,导致小鼠死亡? 因为R型细菌转化成了S型细菌,使小鼠患败血症而死亡.格里菲思实验的推论是什么? 已经被加热杀死的S型细菌中,必然含有某种促成这一转化的活性物质—— 转化因子[质粒] ?1、实验材料:2、实验目的:3、实验操作:2、艾弗里确定转化因子的肺炎双球菌转化实验 (体外转化实验) 1944年 O.Abery选用肺炎双球菌为了弄清转化因子到底是什么? 将S型细菌中的多糖、 蛋白质、脂质和DNA等提取出来,、DNA酶+DNA,分别与R 型细菌进行混合培养。艾弗里设计思路:设法把DNA与蛋白质分开,研究各自的效应 分别与R型活细菌混合培养S型活细菌 多糖 脂类 蛋白质RNA DNA DNA水解物 R R R RR S R 多数 少数 DNA的纯度越高,转化就越有效。 R S艾弗里的实验结论: DNA是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质,DNA是转化因子。 以上转化实验表明:D N A 是 遗 传 物 质 蛋白质不是遗传物质。对艾弗里实验的质疑: 提取DNA的纯度最高时还有0.02%的蛋白质 肺炎双球菌转化实验过程中是否能说明DNA 是唯一的转化因子? ③1952年,郝尔希和蔡斯(A.HersheyM.Chase)的实验方法——同位素标记法③1952年,郝尔希和蔡斯(A.HersheyM.Chase)的噬菌体侵染细菌试验郝尔希和蔡斯设计思路:设法把DNA与蛋白质分开,研究各自的效应实验方法——同位素标记法侵入合成组装释放噬菌体侵染细菌的动态过程:吸附侵入别的细菌(1)T2噬菌体的结构模式图DNA占40%[P几乎都存在与DNA中]化学成分实验指标结构蛋白质占60%[S只存在于蛋白质]怎样使噬菌体外壳带上35S标记?怎样使噬菌体DNA带上32P标记? 要使噬菌体带有放射性标记,必须使噬菌体的生活环境中带有放射性,而噬菌体又是寄生生活(寄生在细菌体内),所以应先使细菌带有放射性,要使细菌带有放射性,必须使细菌的生活环境中带有射性,即将细菌分别放在带有35S和32P培养液中培养一段时间,使细菌分别带上35S和32P标记,再用噬菌体分别去感染这两种细菌,就能使噬菌体分别带上这两种放射性。获得了含有放射性标记的噬菌体,就可以在噬菌体侵染细菌的过程中检测到DNA或蛋白质,但仍然有一个问题没有解决:如何判断检测到的DNA是在细菌内还是在细菌外呢?因为微小的细菌也不是我们能够直接观察到了的。科学家用的是离心分离的方法,由于细菌较重,将会通过离心被沉淀下来,而细菌外的成分包括噬菌体以及其它较轻的成分就存在于上清液中。如果侵染细菌的噬菌体含32P,则侵染细菌后32P随DNA进入细菌,通过离心分离后就会出现在沉淀中。但在实验的过程中有些噬菌体可能并没有侵入细菌,这部分噬菌体将会存在于上清液中,上清液中也就可以检测到少量放射性同位素;如果噬菌体侵染细菌的时间过长,那么由于细菌的破裂,会使大量的噬菌体从细菌中释放出来,这样上清液中放射性32P含量升高。实验过程:寄主细胞内子代噬菌体亲代噬菌体35S标记蛋白质无35S标记蛋白质外壳蛋白质没有35S被感染的大肠杆菌亲代噬菌体寄主细胞内子代噬菌体32P标记DNA无32P标记DNADNA有32P标记35S标记蛋白质子代噬菌体外壳蛋白质没有35S32P标记DNA子代噬菌体DNA有32P标记结论: 噬菌体侵染细菌时,DNA进入到细菌的细胞中,而蛋白质外壳仍留在外面。因此DNA才是真正的
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