紫外-可见分光光度法2.pptVIP

* * 闪耀光栅：利用光栅槽面的平面反射作用，使衍射光集中到某一角度范围内，因而在某一角度观察时，可得到特别明亮的光谱。适当选择线角度，可使闪耀角定向到所需的光域。 * * 用于检测光信号。利用光电效应将光强度信号转换成电信号的装置，也叫光电器件。 分光光法中，得到的是一定强度的光信号，这个信号需要用一定的部件检测出来。检测时，需要将光信号转换成电信号才能测量得到。光检测系统的作用就是进行这个转换。 * * 用半导体材料制成的光电转换器。硒光电池 / 硅光电池 * * 光电管的阳极，它由一个镍环或镍片组成； 光电管的阴极，它由一个金属片上涂一层光敏物质（碱金属或碱金属氧化物）构成，如涂上一层氧化铯。涂上的光敏物质具有这样一个特性：当光照射到光敏物质上时，它能够放出电子； 电池，其作用是在阴、阳极之间加上一电压； 放大器，放大由光电管产生的电信号； 阴极表面可涂渍不同光敏物质：高灵敏(K,Cs,Sb其中二者)、红光敏(Na/K/Cs/Sb, Ag/O/Cs)、紫外光敏、平坦响应(Ga/As，响应受波长影响小)。产生的光电流约为硒光电池的1/10。 优点：阻抗大，电流易放大；响应快；应用广。 缺点：有微小暗电流（Dark current，40K的放射线激发）。 * * 而一般分光光度计（光电管或光电倍增管），波长测定范围和间隔不变，测定速度1/10秒，则从190nm～820nm，需扫描31.6秒才得全部数据。 * * 杂散光　以测量讯号较弱波长处（200、220、310、340处）所含杂散光的强度百分比为指标。220nmNaI（1%g/ml) ≤5%。 * * 药物所含杂质，常制定一个允许其存在的最高限量，超过该值，会影响疗效或引起副作用，药物就不合格。 * * 若仪器的单色器分出的单色光谱带宽S较大，单色光不纯，就不能用吸光系数法进行定量。因这时的E值随所用仪器的不同而变化。 但若固定仪器、固定工作状态和测量条件，C和A在很多情况下（尤其较低浓度时）仍成线性关系：A=KC。 但K不再是物质的特性常数，只是个别具体情况下的比例常数，不能通用，定量必须用标准曲线法。 * * 该题也可按吸收系数法来理解计算。 * * 选测量波长λ2、 参比波长λ1， 选择原则： ①干扰组分b在λ2和λ1有相同E值 ②被测组分a在λ2和λ1有较大ΔE值 * * 数学变换法是通过数学处理对以Beer定律为基础的吸光度分析作一次数学的抽象，建立吸收曲线的数学信息与物质的量之间的联系，并据此对物质进行定性、定量的方法。导数光谱法是数学变化法中的一种。 * * （一般仪器可给出四阶导数光谱） * * 等等。在任意一波长处，导数光谱的数值与浓度成正比，这是导数光谱用作定量的理论依据。 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca 3．两组分吸收光谱完全重叠 ——混合样品测定 （1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法 （3）系数倍率法 （4）其他方法 （1）解线性方程组法 步骤： （2）等吸收双波长消去法 步骤： 消除a的影响测b 消去b的影响测a 双波长法须满足两个基本条件： a. 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 b. 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大； （3）系数倍率法 前提： 干扰组分b不成峰形 无等吸收点 续前 步骤：b曲线上任找一点→λ1 另一点→λ2 a b λ1 λ2 优点： 同时将待测组分和干扰组分在λ2处的信号放大K倍，使ΔA值增大，灵敏度提高。 但K值以5～7为限，否则因噪声的放大，使信噪比减小而不利于测量。 （4）导数光谱法 A=CLE=CL?f（λ） 把一个吸收光谱写成一个波长的函数： A～λ函数图： 0 阶光谱图 函数图： 函数图： 函数图： 一阶导数光谱图 二阶导数光谱图 …… n阶导数光谱图 导数光谱图作法： 手工计算作图：每隔1～2nm，逐点计算 利用仪器计算机记忆与数据处理功能 导数光谱的波型和特点 ① 峰在 单数阶导数图是 0值 偶数阶导数图 极值 （利于峰值鉴定） ②拐点在 单数阶导数图是 极值 偶数阶导数图 0值 （鉴别肩峰） ③