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解冻:同盐水洗涤法; 洗涤脱甘油:边搅拌边加入与甘油化红细胞等体积的50% 的葡萄糖液,再加入蔗糖溶液,等待红细胞聚集沉淀后去除上清液。再用10% 蔗糖溶液500ml 反复洗涤两次,除去上清液。加入生理盐水混匀,离心除去上清液。再加入生理盐水100ml 制成红细胞悬液。 (2)低浓度甘油超速冷冻法 甘油浓度在20% 左右,将红细胞快速(1.5-2.0分钟)冰冻并保存在-196 ℃液氮中,输注前从液氮中取出,立即在45℃水浴中震荡快速解冻并进行洗涤 ㈢保存 冰冻红细胞最大的有点可长期保存,高浓度甘油的红细胞可以保存3年,低浓度甘油超速冷冻的红细胞可以保存10年。高浓度甘油冷冻的红细胞在-80保存,超低温冰箱即可保存。 解冻后的红细胞保存在温度4℃±2℃ 自制备后尽快输注,最好在6小时之内输用,保存不超过24小时 六、年轻红细胞 ㈠概念 年轻红细胞是一种具有较多的网织红细胞、酶活性相对增高、平均细胞年龄较小的红细胞成分。大多用血液细胞分离机制备。年轻红细胞存活期明显长于成熟红细胞,半存活期为44.9天,而成熟红细胞仅为29天 保存 输入体内可相对延长存活期,所以对长期依赖输血的贫血患者,重型珠蛋白生成障碍性贫血患者疗效较好。 保存同其他红细胞成分 七、辐照红细胞 用射线照射灭活活性淋巴细胞的红细胞制剂,用来预防TA-GVHD的发生,血液制剂的最佳辐照量是完全消除供血者淋巴细胞的有丝分裂能力而不破坏其他血液细胞功能。我国要求的照射剂量为25Gy. 保存 美国FDA规定红细胞辐照后保存不超过28天,最好尽快输注,输后体内回复率应﹥75%。欧洲会议推荐红细胞的辐照应在采血后14天内进行,并且辐照后红细胞的保存时间应在辐照后14天内 第三节 血小板的制备和保存 手工法 制备出的血小板为浓缩血小板并可进行多人分汇集保存和输注,一般从献血员采集200ml或400ml全血采用离心分离后手工挤压分离出血小板制剂。目前我国规定手工法由200 ml全血制备浓缩血小板为1u,所含血小板数≥2.0×1010 机器单采法 用血细胞分离机从单一献血者体内进行直接采集,制备的血小板为单采血小板,可从单一献血者体内采集1或2个成人治疗剂量的血小板。我国规定一个治疗单位(剂量)为≥2.5×1011 无论哪种血小板均可进行进一步处理,已获得更为高质量和安全的血小板制剂,如去除白细胞,病毒灭活,辐照等处理,可得到相应的血小板制剂 2.根据血液成分的不同比重,选择不同的相对离心力进行离心,分离出不同的成分 最早的持续性离心装置是在1877年瑞典医生Carl 研究的手柄式乳烙分离器,1881年在美国获得专利。后来,运用这种原理制造的离心机用于石油工业清除不纯的润滑油中的颗粒;在核燃料工业中处理铀同位素中的固体和液体废物。1950年美国科学家Cohn在哈佛大学首先发明了持续性血液分离机分离血液成分。这些装置都是根据不同成分的密度来设置的。 3.血液成分手工制备的注意事项 ★制备新鲜冰冻血浆时,保养液为CPD CP2D CPDA-1的血液应该在8小时之内分离并速冻 ★保养液为ACD的血液应在6小时之内分离并速冻 第二节 红细胞的制备和保存 红细胞制剂是由全血去除部分血浆制备而成。 从200ML全血制备的各种红细胞制品为1U 一、浓缩红细胞 ㈠概念 浓缩红细胞也称为压积红细胞或少浆血,是将采集的全血大部分的血浆在全封闭的条件下分离后剩余的部分所制成的红细胞成分血。可以在全血有效保存期内任何时间分离出部分血浆制备而成,一般用二联袋采集的全血制备浓缩红细胞 ㈡制备 (1)用二联袋采集1单位或2单位全血于主袋内; (2)将全血在4℃±2℃离心,离心3400×g, 离心7分钟,沉淀红细胞; (3)取出离心后全血,将部分血浆分入 空的转移袋内; (4)用热合机切断塑料袋间的连接管, 制备成浓缩红细胞。 ㈢浓缩红细胞的保存 保存在4℃±2℃保存液 CPD ACD-B保存期21天 CPDA-1 保存液为35天 二、悬浮红细胞 ㈠概念 悬浮红细胞又称添加剂红细胞,将全血中的大部分(90%)血浆在全封闭的条件下分离后并向剩余物中加入红细胞添加液制成的红细胞成分 ㈡制备 ⒈单袋制备法 用单个塑料袋采集血液,离心后在无菌条件下与空塑料袋相连接,把上层血浆分离移入空袋,将等量的保存液加入红细胞内充分混匀。单袋制备方法要求严格的制备环境,整体环境达万级净化,局部操作空间达百级净化。 ⒉联袋制备法
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