基因诊断基因治疗chapter24.docVIP

第四章 基因治疗技术与方法 基因治疗技术与方法 1 基因转移 将基因转移入相应的靶细胞中是基因治疗的前提。外源基因是能被转移入生殖细胞或体细胞的。生殖细胞基因转移导致基因型的改变，这种改变能代代相传，所以目前对此有很大的伦理学上的问题。体细胞基因转移则仅引起个体的遗传学改变，不涉及后裔。 体细胞基因转移 实施体细胞基因转移有两种方法：in vivo和ex vivo，均已在体细胞基因疗法中应用过。Ex vivo法是从病人处收集细胞，将这些细胞在体外培养并导入重组基因，然后将这些在遗传上加工的细胞作为自体移植物重新植回病人体内。In vivo法是将重组基因直接送进活体内各种体细胞中。一般说，基因治疗的ex vivo基因转移可能要比In vivo基因转移的许多方法危险性更高些。目前已经有许多种技术可将基因转移入真核细胞中，绝大多数仅能用于体细胞基因疗法。 在基因治疗中迄今所应用的基因转移方法可分为两大类：病毒方法和非病毒方法。体细胞基因转移的理想方法是将一定量的任何DNA能以100%的效率导入任何类型的靶细胞中。此转基因（transgene）必须或是整合在染色体中，或是成为稳定的附加体（episome）存在于该被遗传修饰的细胞后裔中，并且还要在该靶细胞中长时期有效表达。 1.1 基因转移的非病毒方法 虽然非病毒介导的基因转移效率低且为瞬时表达，但也相对比较安全，在美国及欧洲一些国家